masterThesis
Ocorrencia de bacteriocinas e caracterizacao molecular de linhagens de Zymomonas mobilis
Registro en:
Manoella de Souza Lima, Gláucia; Magali de Araújo, Janete. Ocorrencia de bacteriocinas e caracterizacao molecular de linhagens de Zymomonas mobilis. 2002. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia de Produtos Bioativos, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2002.
Autor
Manoella de Souza Lima, Gláucia
Institución
Resumen
O fermentado de Zymomonas mobilis tem apresentado diversas aplicações
terapêuticas contra várias infecções bacterianas. Diante desse fato, o presente trabalho
teve como objetivo relacionar a ação terapêutica de Z. mobilis com a produção de
bacteriocina além de caracterizar as linhagens através de SDS-PAGE, RAPD e rep-PCR.
Para verificar a ocorrência de bacteriocina, foram testadas 6 linhagens de Zymomonas
mobilis (CP4, Z1-86A, Z1-86B, Z1-87, Z1-88 e Z2-88) contra as linhagens Escherichia coli
K12, E. coli BH57, E. coli ATCC 9637, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus e
Streptococcus faecalis. Os resultados obtidos mostram que todas as linhagens de
Zymomonas produzem bacteriocina, exibindo um amplo espectro de ação. Os perfis de
atividade antimicrobiana mostraram diferenças significativas em relação ao
heteroantagonismo. Foi avaliada também a influência do meio de cultura (SSDL e
Schreder) e temperatura (30ºC e 37ºC) na expressão da atividade antagonista produzida
pela Z. mobilis. Os dois meios foram eficientes para produção de bacteriocina, porém foi
observada melhor atividade bacteriocinogênica para a linhagem Z1-87 no meio Schreder
a 37ºC. As bacteriocinas permaneceram estáveis até 80ºC por 15 minutos e foram
inativadas pela proteinase K. Não foram observados bacteriófagos e ácidos atuando como
prováveis inibidores de crescimento. A cinética da produção de bacteriocina da linhagem
Z1-87 no meio Schreder revelou que a produção iniciou na fase logarítmica e se
estabilizou na fase estacionária. A análise eletroforética de proteínas totais não foi eficaz
para a caracterização genética das linhagens de Z. mobilis. Com a técnica de RAPD
foram selecionados sete primers os quais originaram 47 bandas, sendo possível
evidenciar o polimorfismo entre as linhagens. O rep-PCR foi bastante sensível para
detectar diferenças genéticas entre as linhagens, utilizando os primers ERIC e REP. As
linhagens apresentaram um nível de similaridade em torno de 62%