Tesis
Genotipagem de Candida albicans e Candida dubliniensis potencialmente patogênicas isoladas da cavidade bucal e prótese odontológica = Genotyping of potentially pathogenic Candida albicans and Candida dubliniensis isolated from oral cavity and dental prosthesis
Genotyping of potentially pathogenic Candida albicans and Candida dubliniensis isolated from oral cavity and dental prosthesis
Registration in:
RODRIGUES NETTO, Manoel Francisco. Genotipagem de Candida albicans e Candida dubliniensis potencialmente patogênicas isoladas da cavidade bucal e prótese odontológica = Genotyping of potentially pathogenic Candida albicans and Candida dubliniensis isolated from oral cavity and dental prosthesis. 2016. 1 recurso online ( p.). Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP.
Author
Rodrigues Netto, Manoel Francisco, 1984-
Institutions
Abstract
Orientador: Marcelo Fabiano Gomes Boriollo Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo desse estudo foi avaliar a colonização bucal e protética de espécies de Candida, considerando a diversidade genética, sensibilidade antifúngica e virulência in vitro de C. albicans e C. dubliniensis. Esse estudo incluiu 58 sujeitos distribuídos em 4 grupos ¿ A (primeira reabilitação por próteses parciais), B (substituição das próteses parciais), C (primeira reabilitação por próteses totais) e D (substituição das próteses totais) ¿ e 242 amostragens (cavidade oral e próteses odontológicas) obtidos em 2 momentos (intervalo de ±30 dias). A caracterização preliminar das espécies de Candida foi feita em meio cromogênico. C. albicans e C. dubliniensis foram identificadas por PCR espécie-específico e seus genótipos de DNA microssatélites (CAI, CDC3, CPH1, ERK1, KRE6, LOC4, MNT2 e ZNF1) analisados por procedimentos de PCR e PAGE. A diversidade genética foi analisada por análises genéticas e de agrupamento. A triagem antifúngica foi realizada por disco-difusão. Atividades exoenzimáticas hidrolíticas foram determinadas por métodos microbiológicos. Na amostragem inicial, a colonização oral por espécies de Candida foi observada em 31 (53.4% ¿ 25 por C. albicans e 6 por C. não-albicans) sujeitos: grupos A (33.3%), B (68.2%) e D (65%). A colonização nas próteses foi observada em 20 (47.6% ¿ 18 por C. albicans e 2 por C. não-albicans): grupos B (50%) e D (45%). A segunda amostragem revelou espécies de Candida em 2 (3.4%: cavidade oral) e 4 (6.9%: próteses) sujeitos do grupo B. Padrões policlonais e monoclonais foram observados nas amostras e 26 clusters e 17 taxa foram identificados. Elevada incidência de C. albicans azólica-resistente e SAPs-positivo foi detectada. Próteses odontológicas removíveis parciais e totais apresentaram alta incidência de espécies de Candida. Grupo A e controle (sujeitos clinicamente saudáveis) mostraram uma incidência equivalente de Candida spp. Em geral, C. albicans foi a espécie mais prevalente. Isolados clínicos de C. albicans exibiram resistência azólica, diferentemente de C. dubliniensis, e foram considerados potencialmente virulentos. Cepas geneticamente relacionadas de C. albicans e C. dubliniensis (intra-cluster) podem ser encontradas intra- e inter-sujeitos, -nichos orais, -gêneros, -grupos e -tempos de amostragem. O padrão de clonalidade e o relacionamento genético de cepas podem ser eliminados, reduzidos ou alterados por tratamentos odontológicos e higiene bucal e protética Abstract: The aim of this study was to evaluate the oral and prosthetic colonization of Candida species, considering the genetic diversity, antifungal sensitivity and virulence in vitro of C. albicans and C. dubliniensis. This study included 58 subjects assigned to 4 groups ¿ A (first rehabilitation by partial dental prostheses), B (replacement of partial prostheses), C (first rehabilitation by total dental prostheses), D (replacement of total prostheses) ¿ and 242 samples (oral cavity and dental prostheses) obtained in 2 moments (± 30 days interval). Preliminary characterization of the Candida species was done in chromogenic medium. C. albicans and C. dubliniensis were identified by species-specific PCR and their DNA microsatellite genotypes (CAI, CDC3, CPH1, ERK1, KRE6, LOC4, MNT2 and ZNF1 gene) analyzed by PCR and PAGE procedures. The genetic diversity was analyzed by genetic and clustering analyses. The antifungal screening was performed by disc-diffusion. Hydrolytic exoenzyme activities (SAPs and PLs) were determined by microbiological methods. In the first sampling, oral cavity colonization was observed in 31 (53.4% ¿ 25 by C. albicans and 6 by C. non-albicans) subjects: groups A (33.3%); B (68.2%); and D (65%). Colonization in dental prostheses was observed in 20 (47.6% ¿ 18 by C. albicans and 2 by C. non-albicans) subjects: groups B (50%) and D (45%). The second sampling showed Candida species in 2 (3.4%: oral cavity) and 4 (6.9%: dental prostheses) subjects in group B. Polyclonal and monoclonal patterns were observed in the samples and 26 clusters and 17 taxa were identified. High incidence of azolic-resistant C. albicans and SAPs-positive was detected. The partial and total removable dental prostheses showed a high incidence of Candida species. Group A and control (clinically healthy subjects) showed an equivalent incidence of Candida spp. In general, C. albicans was the most prevalent species. Clinical isolates of C. albicans exhibited azole resistance, unlike C. dubliniensis, and were considered potentially virulent. C. albicans and C. dubliniensis genetically related strains (intra-cluster) can be found intra- and inter- subjects, - oral niches, -gender, -group and-time of sampling. The clonality pattern and strains genetic relationship can be eliminated, reduced or changed by dental care and oral and prosthetic hygiene Doutorado Microbiologia e Imunologia Doutor em Biologia Buco-Dental 1557768/2011-2; CNPQ FAPEMIG
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