“Detección molecular de regiones oncogénicas E6 y E7 de Virus del Papiloma Humano mediante PCR en pacientes Papanicolaou negativo del Instituto Regional de Enfermedades Neoplásicas de La Libertad.”

Abstract

La presente investigación detectó regiones oncogénicas E6 y E7 de VPH mediante PCR en pacientes Papanicolaou negativo del Instituto Regional de Enfermedades Neoplásicas de La Libertad. Se tomaron muestras de tejido endocervical para ser analizadas, de las cuales se seleccionaron 20 cuyos resultados fueron negativos aplicando la técnica convencional de Papanicolaou. Se procedió a la extracción y purificación de ADN utilizando el kit “High Pure PCR Template Preparation Kit” de Roche, de acuerdo al protocolo de extracción se procedió a la amplificación de genes L1 y L2, utilizando primers genéricos MY09/11 y GP5+/6+ para detectar VPH de manera inespecífica, seguido de esto se amplificó los oncogenes E6 y E7 utilizando primers para genotipos de alto riesgo (VPH 16, 18, 31, 33 y 52) y bajo riesgo (VPH 6/11). Mediante electroforesis en gel de poliacrilamida al 4%, se realizó la tinción con nitrato de plata y se interpretaron los perfiles electroforéticos de acuerdo a la longitud del amplicón. Se obtuvo como resultado que el 75% de pacientes presentaron oncogenes E6 y E7 de VHP 16, el 15% de VPH 52, el 10% de VPH 18, el 5% VPH 33, 0% de VPH 31 y el 20% de VPH 6/11. Por otro lado se observó que un 50% presentaron infecciones simples por VPH 16 y 20% por VPH 6/11. Mientras que un 25% presentaron infecciones múltiples por genotipos de alto riesgo (VPH 16, 18, 33 y 52). Se concluyó que se pudo detectar regiones oncogénicas E6 y E7 de VPH mediante la PCR en pacientes Papanicolaou negativo. Así mismo, que existe una alta incidencia de oncogenes de VPH 16, y en menor grado VPH 52, 18 y 33 presentes solo en infecciones múltiples.