Standardization of Northern blot non-radioactive Protocol Used in the Detection of SRNAs in Vero Line Cells

dc.creatorCampillo Pedroza, Natalia
dc.creatorFranco Salazar, Juan Pablo
dc.creatorGallego Gómez, Juan Carlos
dc.date2023-03-27T21:00:19Z
dc.date2023-03-27T21:00:19Z
dc.date2015
dc.date.accessioned2024-04-23T18:20:43Z
dc.date.available2024-04-23T18:20:43Z
dc.identifier0123-3475
dc.identifierhttps://hdl.handle.net/10495/34258
dc.identifier10.15446/rev.colomb.biote.v17n2.48522
dc.identifier1909-8758
dc.identifierhttps://revistas.unal.edu.co/index.php/biotecnologia/article/view/48522/53716
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/9230717
dc.descriptionRESUMEN: El interés en la detección, identificación, y caracterización funcional de los pequeños RNAs no codificantes (sRNAs), ha generado la necesidad de optimizar las metodologías comúnmente usadas en su detección, la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (RT-qPCR) y Northern blot, con el fin de que sean más sensibles y específicas. A pesar de la baja sensibilidad del Northern blot, esta metodología continúa siendo de uso común en la detección de sRNAs porque permite detectar el RNA pequeño así como a sus precursores, razón por la cual se usa como una metodología complementaria en este tipo de investigaciones. En este trabajo se describe la implementación de un nuevo protocolo para Northern blot no radioactivo, con modificaciones dirigidas a mejorar su sensibilidad y especificidad. El diseños de la sonda con la tecnología LNA, el marcaje de esta con Digoxigenina y por último la fijación del RNA a la membrana mediante 1-Ethyl-3-(-3-dimethyla-minopropyl) carboniimide (EDC) y finalmente se discuten los fundamentos teóricos de estos cambios.
dc.descriptionABSTRACT: The interest in detection, identification and functional characterization of small non-coding RNAs (snRNAs), has generated the need to optimize the methodologies commonly used in its detection in specificity and sensitivity, The Quantitative reverse transcription PCR (RT-qPCR) and Northern blot. Even though the low sensitivity of Northern blot, this method con-tinues to be commonly used in the sRNAs, because its capacity to detect the sRNA and its precursor, which is the reason why Northern blot is used as complementary method in this sort of Research. This work describes the implementation of an innovative non-radioactive Northern blot protocol, with modifications that improving the sensibility and specificity, with the discussion of the theoretical foundations of such modifications.
dc.descriptionCOL0140139
dc.format6
dc.formatapplication/pdf
dc.formatapplication/pdf
dc.languagespa
dc.publisherUniversidad Nacional de Colombia, Instituto de Biotecnología
dc.publisherGrupo Medicina Molecular y de Translación
dc.publisherBogotá, Colombia
dc.relationRev. Colomb. Biotecnol.
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by/2.5/co/
dc.rightshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rightshttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.subjectDigoxigenin
dc.subjectDigoxigenina
dc.subjectNucleic Acid Probes
dc.subjectSondas de Ácido Nucleico
dc.subjectRNA, Satellite
dc.subjectSatélite de ARN
dc.subjectNorthern Blotting
dc.subjectBlotting, Northern
dc.titleEstandarización de un protocolo para Northern blot no radioactivo usado en la detección de pequeños RNA en células Vero
dc.titleStandardization of Northern blot non-radioactive Protocol Used in the Detection of SRNAs in Vero Line Cells
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/article
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.typehttp://purl.org/coar/resource_type/c_2df8fbb1
dc.typehttps://purl.org/redcol/resource_type/ARTCORT
dc.typeArtículo de investigación


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