Produ????o e estudo de atividade antiangiog??nica de prote??nas de fus??o endostatina-dom??nio BH3 das prote??nas pr??-apopt??ticas PUMA e BIM

Production and study of the antiangiogenic activity of the fusion proteins endostatin-BH3 domain of the pro-apoptotic proteins PUMA and BIM

dc.contributorLigia Ely Morganti Ferreira Dias
dc.creatorSILVA, NATAN V. da
dc.date2015
dc.date2016-12-22T11:54:03Z
dc.date2016-12-22T11:54:03Z
dc.date.accessioned2023-09-28T13:31:57Z
dc.date.available2023-09-28T13:31:57Z
dc.identifierhttp://repositorio.ipen.br/handle/123456789/26940
dc.identifier10.11606/D.85.2016.tde-23032016-155417
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8997229
dc.descriptionA endostatina (ES) ?? uma prote??na inibidora da angiog??nese, com a????o espec??fica sobre c??lulas endoteliais em prolifera????o, utilizada para tratamento de tumores s??lidos. No entanto, o elevado efeito antitumoral da ES observado em animais n??o ?? reproduzido em humanos. Com o intuito de potencializar a efic??cia terap??utica da ES, produzimos duas prote??nas h??bridas com dois dom??nios funcionais. O primeiro dom??nio ?? a ES, que apresenta especificidade por c??lulas endoteliais ativadas, dirigindo estas prote??nas de fus??o ??s c??lulas endoteliais em prolifera????o, promovendo sua internaliza????o e seu efeito inibit??rio. Como segundo dom??nio funcional utilizamos os dom??nios BH3 pr??apopt??ticos de duas prote??nas BH3-only com o objetivo de promover a libera????o de citocromo C e desencadear o processo de apoptose, aumentando a a????o antiangiog??nica da ES. Neste trabalho, foram desenhadas duas prote??nas de fus??o que cont??m o dom??nio BH3 das potentes prote??nas pr?? apopt??ticas PUMA e BIM (ES-PUMA e ES-BIM), que deveriam apresentar efeito antiangiog??nico potencializado em rela????o ?? ES selvagem. A inser????o dos fragmentos de DNA codificantes para os dom??nios BH3 de PUMA e BIM no vetor contendo o gene da ES (pET-ES) foram realizadas por mutag??nese s??tiodirigida. Estas prote??nas de fus??o recombinantes foram expressas como corpos de inclus??o em E.coli, renaturadas utilizando processo que utiliza alta press??o e purificadas em resina de afinidade por heparina. O tratamento de c??lulas endoteliais com as prote??nas ES-PUMA e ES-BIM n??o levou ?? queda de viabilidade em ensaio de MTS ou de apoptose avaliado por citometria de fluxo, em compara????o com os resultados obtidos pelo tratamento com ES.
dc.descriptionDisserta????o (Mestrado em Tecnologia Nuclear)
dc.descriptionIPEN/D
dc.descriptionInstituto de Pesquisas Energ??ticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP
dc.format38
dc.rightsopenAccess
dc.subjectangiogenesis
dc.subjectblood vessels
dc.subjectcarcinogenesis
dc.subjectgrowth factors
dc.subjectneoplasms
dc.subjecttumor cells
dc.subjectcollagen
dc.subjectresins
dc.subjectpolysaccharides
dc.subjectprotein engineering
dc.subjectreticuloendothelial system
dc.subjectcounting techniques
dc.subjectmolecular biology
dc.subjectbiotechnology
dc.subjectmedical examinations
dc.subjectmedical surveillance
dc.subjectdiagnosis
dc.titleProdu????o e estudo de atividade antiangiog??nica de prote??nas de fus??o endostatina-dom??nio BH3 das prote??nas pr??-apopt??ticas PUMA e BIM
dc.titleProduction and study of the antiangiogenic activity of the fusion proteins endostatin-BH3 domain of the pro-apoptotic proteins PUMA and BIM
dc.typeDisserta????o
dc.coverageN
dc.localS??o Paulo


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