Obten????o, caracteriza????es estruturais e atividade enzim??tica do s??tio C-catal??tico da enzima conversora de angiotensina I - regi??o ALAsup(959) at?? SERsup(1066)

Obtaining, structural characterization and enzymatic activity of the C catalytic site of angiotensin convertin enzyme I ALA959 to SER1066 region

dc.contributorRegina Affonso
dc.creatorELIAS, CAROLINE C.
dc.date2015
dc.date2015-12-17T09:13:12Z
dc.date2015-12-17T09:13:12Z
dc.date.accessioned2023-09-28T13:26:43Z
dc.date.available2023-09-28T13:26:43Z
dc.identifierhttp://repositorio.ipen.br/handle/123456789/25320
dc.identifier10.11606/D.85.2015.tde-23112015-083845
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8995667
dc.descriptionA enzima conversora de angiotensina (ECA) catalisa a convers??o de angiotensina I (Ang I) no vasoconstritor angiotensina II (Ang II) e hidrolisa a bradicinina (BK). ECA som??tica (sECA) possui dois dom??nios hom??logos (N e C) que t??m 60% de identidade. Embora estas duas regi??es tenham homologia grande, o s??tio catal??tico C-dom??nio exibe uma atividade tr??s vezes maior do que o N-dom??nio na hidrolise de Ang I in vivo. Este fato torna interessante o desenvolvimento de novos estudos de inibidores ou a melhoria dos j?? existentes. O objetivo deste estudo foi obter a regi??o Ala959 at?? Ser1066 do Cdom??nio da sECA (c-sECA), em uma estrutura conformacional semelhante ?? estrutura nativa. N??s amplificamos a sequ??ncia correspondente ao s??tio catal??tico da c-sECA com 324pb e clonamos esta sequ??ncia no vetor pET 28a(+). O segmento (nomeado de pET28_c-sECA) foi expresso em sistema bacteriano. A prote??na foi expressa na forma sol??vel e a purifica????o foi feita em uma ??nica etapa utilizando a coluna de afinidade His-tag, a qual produziu a prote??na pura. An??lises estruturais por dicro??smo circular e fluoresc??ncia confirmaram que a prote??na recombinante estava na conforma????o correta, e os ensaios de atividade mostraram que a c-sECA possui atividade enzim??tica e ?? inibida por lisinopril.
dc.descriptionDisserta????o (Mestrado em Tecnologia Nuclear)
dc.descriptionIPEN/D
dc.descriptionInstituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP
dc.format63
dc.rightsopenAccess
dc.subjectcardiovascular diseases
dc.subjectcardiovascular system
dc.subjectblood circulation
dc.subjecthypertension
dc.subjectenzyme inhibitors
dc.subjectenzyme activity
dc.subjectangiotensin
dc.subjectdna
dc.subjectescherichia coli
dc.subjectprotein structure
dc.subjectmolecular biology
dc.titleObten????o, caracteriza????es estruturais e atividade enzim??tica do s??tio C-catal??tico da enzima conversora de angiotensina I - regi??o ALAsup(959) at?? SERsup(1066)
dc.titleObtaining, structural characterization and enzymatic activity of the C catalytic site of angiotensin convertin enzyme I ALA959 to SER1066 region
dc.typeDisserta????o
dc.coverageN
dc.localS??o Paulo


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