| dc.contributor | Nascimento, Rodrigo Pires do | |
| dc.contributor | Barreto Júnior, Amaro Gomes | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/1005756226202071 | |
| dc.contributor | Coelho, Maria Alice Zarur | |
| dc.contributor | Alviano, Celuta Sales | |
| dc.contributor | Sant’Ana, Gizele Cardoso Fontes | |
| dc.creator | Kalaoun Filho, Samir | |
| dc.date | 2023-07-20T18:29:02Z | |
| dc.date | 2023-09-27T03:01:47Z | |
| dc.date | 2017-08 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-27T14:09:59Z | |
| dc.date.available | 2023-09-27T14:09:59Z | |
| dc.identifier | http://hdl.handle.net/11422/21181 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8919935 | |
| dc.description | A produção de macromoléculas biológicas, tais como as proteínas, é um dos
principais ramos de estudo da indústria biotecnológica. A soroalbumina humana (HSA)
é a proteína mais abundante do plasma sanguíneo, apresentando funções vitais de
manutenção da pressão osmótica sanguínea, manutenção do pH e transporte de
moléculas. O principal método utilizado para obter a HSA hoje, é o fracionamento por
etanol a frio a partir de amostras de sangue obtidos via doação, sendo um processo
limitado pela quantidade de sangue doado. A fim de evitar o uso de sangue como fonte
de HSA e mitigar alguns dos riscos associados a este procedimento, métodos
alternativos para produzir a soroalbumina humana estão sendo explorados. A HSA
recombinante (rHSA) surge como uma alternativa à HSA plasmática. A rHSA pode ser
desenvolvida e expressa como uma forma alternativa de soroalbumina em sistemas
biológicos (bactérias, leveduras, plantas e animais) de expressão. Assim sendo, o
objetivo deste trabalho foi estudar o uso de Pichia pastoris como um sistema de
expressão biológica para a produção de soroalbumina de rato recombinante (rMSA),
proteína com alto grau de semelhança à HSA, via promotor constitutivo PGAP. Esta
espécie de levedura é comumente utilizada para expressar proteínas em função do seu
rápido crescimento, menor sensibilidade às alterações nutricionais e ambientais, e
capacidade de atingir altas densidades celulares durante o cultivo. A metodologia
consistiu na utilização de frascos agitados e experimentos em biorreator para análise do
crescimento celular, produção de proteínas, concentração de glicose no meio e análise
do gás de exaustão. Após os experimentos, a qualificação dos bioprodutos foi realizada
por eletroforese em gel, e para mensurar a acurácia dos resultados, um balanço de massa
de carbono foi proposto. Os experimentos para a produção de rMSA foram
considerados bem-sucedidos, mesmo produzindo pequena quantidade de proteínas
quando comparado à literatura. Apesar de se almejar valores de produção de rMSA
entre 3 g/L e 10 g/L, os experimentos realizados alcançaram produções de
aproximadamente 0,3-0,4 g/L. Já em relação ao crescimento celular, pode-se observar
que as leveduras atingiram valores de concentração de até 8 g/L, concentrações estas
consideradas baixas de acordo com a literatura. Novos estudos da produção de rHSA e
análogos deverão ser conduzidos para otimizar a produção por rota fermentativa e, em
seguida, sistemas de separação e purificação da proteína em questão devem ser
estudados. Adicionalmente, ainda há alguns desafios e debates em torno da utilização de
soroalbumina, que discutem o papel e a eficácia da proteína em tratamentos médicos,
revisando os critérios utilizados para a regulação de seu uso. | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal do Rio de Janeiro | |
| dc.publisher | Brasil | |
| dc.publisher | Escola de Química | |
| dc.publisher | UFRJ | |
| dc.rights | Acesso Aberto | |
| dc.subject | Albumina | |
| dc.subject | Proteína | |
| dc.subject | Fermentação | |
| dc.subject | Biotecnologia | |
| dc.subject | Microbiologia industrial | |
| dc.subject | CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA QUIMICA::OPERACOES INDUSTRIAIS E EQUIPAMENTOS PARA ENGENHARIA QUIMICA::REATORES QUIMICOS | |
| dc.subject | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA | |
| dc.subject | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL E DE FERMENTACAO | |
| dc.title | Produção de soroalbumina por rota fermentativa utilizando Pichia pastoris | |
| dc.type | Trabalho de conclusão de graduação | |
