Empacotamento de genes de resistência aos antimicrobianos em vesículas extracelulares produzidas por bactérias recuperadas de águas costeiras

dc.contributorPicão, Renata Cristina
dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/2598017261381766
dc.contributorMoreira, Roberto Guardatti Gambine
dc.contributorFerreira, Eliane de Oliveira
dc.contributorMarques, Joana Montezano
dc.contributorBarcellos, Isadora Silva
dc.creatorCosta, Stefanie Camargo da
dc.date2023-06-01T17:27:20Z
dc.date2023-09-27T03:00:33Z
dc.date2023-01-13
dc.date.accessioned2023-09-27T14:08:26Z
dc.date.available2023-09-27T14:08:26Z
dc.identifierCOSTA, S. C. da. (2023). Empacotamento de genes de resistência aos antimicrobianos em vesículas extracelulares produzidas por bactérias recuperadas de águas costeiras [Trabalho de conclusão de curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon.
dc.identifierhttp://hdl.handle.net/11422/20674
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8919509
dc.descriptionA disseminação da resistência aos antimicrobianos (RAMs) aumenta a morbidade e letalidade das infecções, dificultando seu tratamento. Em espécies de bactérias gram-negativas a propagação desses genes tem afetado a eficácia de diversos antimicrobianos. A RAM emerge principalmente nas instituições de saúde, mas as bactérias resistentes não estão restritas a esses ambientes. A aquisição de genes de resistência aos antimicrobianos (GRAs) se deve a três principais mecanismos: conjugação, transdução e transformação. Porém, recentemente, foi descrita a aquisição de GRAs mediada por vesículas extracelulares (VEs), a vesidução. Estas estruturas são constituídas a partir da membrana celular, e podem empacotar uma ampla gama de moléculas do periplasma e citoplasma bacterianos. Embora alguns estudos tenham confirmado a atuação de VEs na transferência de GRAs em condições laboratoriais, o empacotamento de genes que conferem mecanismos de resistência cosiderados de alto risco para a saúde humana permanece pouco explorado. O objetivo do presente trabalho avaliar se VEs extraídas de bactérias coletadas do ambiente aquático são carreadoras de GRA. Para isso, foram estudadas cepas bacterianas previamente caracterizadas, isoladas de águas costeiras recreativas, portadoras de GRAs mediados por plasmídeos. Foram incluídas na coleção do estudo cepas resistentes aos carbapenemas pela produção de carbapenemases, incluindo Enterobacter kobei FL23, Klebsiella pneumonieae ST11-FLC262, Citrobacter werkmanii IncQ - LB887; e uma cepa resistente à polimixina pela produção de mcr, Escherichia coli ST683/CC155 - JP24. A extração de VEs foi realizada a partir de crescimento em meio sólido submetido a ultracentrifugações em PBS, e filtração por membranas com 0,45 micrômetros de poro, para garantir a retenção de células remanescentes. O material foi visualizado por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET), demonstrou a presença de filamentos proteicos e bacteriófagos interagindo com a amostra. A análise do tamanho da população de vesículas foi realizada por rastreamento de nanopartículas (NTA -Nanoparticle Tracking Analysis), cujo resultado demonstrou vesículas entre 100nm a 400nm. A presença de GRAs e dos grupos de incompatibilidade plasmidial dos replicons que carreiam esses genes foram pesquisados por meio da técnica de PCR antes e depois do tratamento das VEs com proteinase K e DNase. Os resultados apontaram para a presença dos genes de incompatibilidade plasmidial IncX3, IncU, IncX4, IncI1, IncQ1, IncA e IncR e dos genes blaNDM-1 e mcr-1.
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Federal do Rio de Janeiro
dc.publisherBrasil
dc.publisherInstituto de Microbiologia Paulo de Góes
dc.publisherUFRJ
dc.rightsAcesso Aberto
dc.subjectGenes de resistência
dc.subjectAnti-infecciosos
dc.subjectVesículas extracelulares
dc.subjectResistance genes
dc.subjectAnti-infective agents
dc.subjectExtracellular vesicles
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
dc.titleEmpacotamento de genes de resistência aos antimicrobianos em vesículas extracelulares produzidas por bactérias recuperadas de águas costeiras
dc.typeTrabalho de conclusão de graduação


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