| dc.contributor | Almeida, Rodrigo Volcan | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/6424652558098121 | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/3128304846999310 | |
| dc.contributor | Brêda, Gabriela Coelho | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/9168413812503687 | |
| dc.contributor | Itabaiana Junior, Ivaldo | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/7696623737124766 | |
| dc.contributor | Secca, Priscilla Filomena Fonseca Amaral | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/3903704349157492 | |
| dc.contributor | Cavalcanti, Elisa d’Avila Costa | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/4292207393341575 | |
| dc.creator | Massaglia, Luca | |
| dc.creator | Campos, Gabriel Mendes | |
| dc.date | 2023-05-11T15:20:37Z | |
| dc.date | 2023-09-27T03:00:31Z | |
| dc.date | 2023-02-16 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-27T14:07:38Z | |
| dc.date.available | 2023-09-27T14:07:38Z | |
| dc.identifier | http://hdl.handle.net/11422/20437 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8919320 | |
| dc.description | Previamente, o nosso grupo de pesquisa clonou em Pichia pastoris duas
lipases presentes na membrana de corpúsculos lipídicos da semente de Ricinus
communis, denominadas RcOBL1 e RcATGL, gerando uma biblioteca de 20
recombinantes com 10 para cada lipase. Nesse contexto, o presente trabalho se
inseriu na produção e caracterização dos extratos brutos dos sobrenadantes dos
cultivos dos recombinantes contendo as lipases de interesse. A partir da
biblioteca gerada, duas cepas foram selecionadas, uma para cada lipase, em
que os meios de cultura, devido a expressão extracelular, apresentaram maior
atividade hidrolítica no éster 4-metilumbeliferil heptanoato (MUF-7), alcançando
valores de atividade de 148,0 U/L e 132,8 U/L para RcOBL1 e RcATGL,
respectivamente, em cultivo em frascos agitados. Dois métodos de concentração
do meio de cultura, liofilização e salting out, foram viáveis para as amostras
contendo as lipases estudadas, acarretando um aumento de atividade entre 111
e 198,5%. Através da caracterização, foi determinado que ambas as lipases
apresentaram melhor atividade em temperaturas acima de 50 °C e pH em torno
de 5, além de uma preferência por substratos de cadeia média e uma boa
estabilidade ao congelamento. O extrato bruto concentrado, no entanto, não foi
capaz de hidrolisar tributirina e óleos vegetais, o que pode ser explicado pela
baixa produção das lipases de interesse, conforme observado em eletroforese
em gel de poliacrilamida. | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal do Rio de Janeiro | |
| dc.publisher | Brasil | |
| dc.publisher | Escola de Química | |
| dc.publisher | UFRJ | |
| dc.rights | Acesso Aberto | |
| dc.subject | Lipase | |
| dc.subject | Semente de mamona | |
| dc.subject | Pichia pastoris | |
| dc.subject | CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA QUIMICA::TECNOLOGIA QUIMICA | |
| dc.title | Caracterização de lipases de mamona (Ricinus communis) expressas em Pichia pastoris | |
| dc.type | Trabalho de conclusão de graduação | |
