| dc.contributor | Boller, Maria Aparecida Affonso | |
| dc.creator | Mendes, Edinéa Pastro | |
| dc.date | 2019-06-19T11:57:33Z | |
| dc.date | 2019-06-19T11:57:33Z | |
| dc.date | 2010 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-27T00:11:27Z | |
| dc.date.available | 2023-09-27T00:11:27Z | |
| dc.identifier | MENDES, Edinéa Pastro. Proposta de metodologias para o controle de matérias-primas a serem utilizadas na produção de conjugados de anticorpos policlonais de cabra com peroxidase de raiz. 2010. 35 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Especialização em Controle da Qualidade em Produtos, Ambientes e Serviços Vinculados à Vigilância Sanitária) - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2010. | |
| dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/33570 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8898349 | |
| dc.description | Os reagentes para diagnóstico são baseados em reações químicas, bioquímicas e imunológicas, para a obtenção de resultados para a avaliação clínica de determinadas patologias. Entre os imunoensaios, o ensaio imunoenzimático (EIE) é um dos métodos mais utilizados para o diagnóstico de diversas doenças. Bio-Manguinhos produz e distribui kits de EIE para o Ministério da Saúde, estes kits são compostos de placas ELISA revestidas com antígenos específicos, soros controle positivos e negativos, cromógeno (tetrametilbenzidina), peróxido de hidrogênio, imunoglobulina G anti-IgG humana ou anti-IgG canina conjugada com peroxidase e soluções para a execução do método. Embora as metodologias que culminam na produção dos kits EIE sejam bem definidas, alguns controles de processos não foram padronizados ou devem ser revistos. Nesse sentido, duas metodologias – espectroscopia por UV e quantificação da atividade enzimática - foram testadas para avaliar três compostos utilizados no processo de conjugação e na etapa da revelação de EIE – TMB, água oxigenada e peroxidase respectivamente. Os controles da quantidade de TMB e peróxido de hidrogênio foram feitos por espectrofotometria de UV, utilizando como parâmetro o coeficiente de extinção destas espécies. Esta metodologia provou ser mais rápida que a titulação de peróxido de hidrogênio realizada pelo Laboratório de Controle Físico-Químico. A avaliação de diversos lotes de TMB mostrou que o método proposto pode ser utilizado como parâmetro de controle de insumos intermediários, evitando o retrabalho ou reprovação de um lote inteiro do reativo para diagnóstico. O controle proposto para a enzima peroxidase foi a quantificação da atividade enzimática, utilizando como substrato pirogalol. Neste caso, os lotes da enzima com atividade biológica menor que a descrita pelo fornecedor, podem ser eliminados para evitar desperdício de tempo e de reagentes utilizados no processo de conjugação. Os controles sugeridos nesta dissertação podem oferecer uma melhor qualidade do produto final e diminuir o número de lotes reprovados. | |
| dc.description | The reagents for diagnosis are based on chemical, biochemical and immunological reactions, to obtain results to help clinical evaluation of some pathologies. Among the immunoassays, the enzyme immunoassay (EIA) is one of the most used methods for diagnosis of several diseases. BioManguinhos produces and distributes EIA kits for the Health Ministry, these kits are composed by EIA plates coated with specific antigens, positive and negative serum control, chromogen (tetramethylbenzidine), hydrogen peroxide, immunoglobulin G anti-human IgG or anti-canine IgG conjugated with horseradish peroxidase and solutions for the method execution. Although the methodologies that culminate in the production of the EIA kits were well defined, some process controls are not implemented or must be reviewed. In this sense, two methodologies were tested to evaluate three compounds used in the conjugation process and in the EIA revelation steps. The Control of the amount of TMB and hydrogen peroxide was made by UV spectrophotometry using as parameter the coefficient of extinction of these species. This methodology proved to be faster than the hydrogen peroxide titration assay performed by the Physical-Chemical Control Laboratory. The evaluation of several TMB lots showed that the proposed method can be used as a control parameter of intermediate inputs by avoiding rework or reprovation of an entire lot of diagnostic assay. The proposed control for the enzyme horseradish peroxidase was the quantification of enzyme activity, using pyrogallol as the substrate. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.rights | open access | |
| dc.subject | Ensaios Sorológicos | |
| dc.subject | Raiz Forte | |
| dc.subject | Serological Tests | |
| dc.subject | Strong Root | |
| dc.subject | Testes Sorológicos | |
| dc.subject | Armoracia | |
| dc.subject | Técnicas Imunoenzimáticas | |
| dc.title | Proposta de metodologias para o controle de matérias-primas a serem utilizadas na produção de conjugados de anticorpos policlonais de cabra com peroxidase de raiz | |
| dc.type | TCC | |
