| dc.contributor | Carvalho, Vinícius de Frias | |
| dc.contributor | Martins, Marco Aurélio | |
| dc.contributor | Melo, Christianne Bandeira de | |
| dc.contributor | Rae, Giles Alexander | |
| dc.contributor | Silva, Adriana Ribeiro | |
| dc.contributor | Trentin, Patrícia Gonçalves | |
| dc.creator | Insuela, Daniella Bianchi Reis | |
| dc.date | 2017-06-28T13:08:36Z | |
| dc.date | 2017-06-28T13:08:36Z | |
| dc.date | 2013 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-26T23:41:32Z | |
| dc.date.available | 2023-09-26T23:41:32Z | |
| dc.identifier | INSUELA, D. B. R. Efeito do glucagon sobre a contração da musculatura lisa das vias aéreas de camundongos A/J. 2013. 100f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular) - Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de janeiro, RJ, 2013 | |
| dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/19545 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8893228 | |
| dc.description | O glucagon é um hormônio hiperglicêmico cuja expressão do receptor foi detectada em pulmões de camundongos, mas pouco é conhecido sobre suas ações nesse órgão. Neste estudo, investigamos o efeito do glucagon sobre a contratilidade do músculo liso das vias aéreas em camundongos A/J e possível mecanismo envolvido. Brônquios e traqueias foram estabelecidos num sistema de banho de órgão isolado, e a resposta contrátil ao carbacol foi medida na presença ou ausência de glucagon (0,1 ou 1 \03BCM) in vitro. Em alguns experimentos, as traqueias foram incubadas com antagonistas do receptor do glucagon (des-His1-[Glu9] glucagon amida; 1 \03BCM) ou dos adrenoceptores \03B2 (propranolol; 1 \03BCM); ou inibidores de NOS (L-NAME; 100 \03BCM), COX (indometacina; 10 \03BCM) ou HO (ZnPP IX; 10 \03BCM), 30 min antes da exposição ao glucagon. Ademais, o epitélio de algumas traqueias foi removido antes do tratamento com glucagon in vitro. A expressão do receptor do glucagon nos pulmões e traqueias com ou sem epitélio foi avaliada por Western blot. O efeito do glucagon sobre a obstrução das vias aéreas provocada pela metacolina em camundongos foi testada in vivo utilizando pletismografia não-invasiva e invasiva. Em alguns experimentos, os camundongos receberam L-NAME (20 mg/Kg) ou indometacina (10 mg/Kg) i.p. 30 min antes do glucagon. Um tratamento com glucagon (0,1 \2013 10 \03BCg/Kg, i.n. ou i.p.) foi realizado durante 7 ou 14 dias, uma vez ao dia, e os níveis de glicose foram avaliados 24 h depois do último dia de tratamento. O efeito do glucagon sobre a hiper-reatividade das vias aéreas à metacolina em camundongos sensibilizados e desafiados com OVA foi avaliado em pletismografia invasiva 24 h após o último desafio
Os animais foram provocados com OVA i.n. (1 \03BCg/\03BCL) durante 2 dias consecutivos e o glucagon foi administrado i.n. 1 h antes ou 1 ou 6 h após cada provocação. O tratamento com glucagon inibiu a contração de brônquios e traqueias induzida pelo carbacol in vitro. A administração de glucagon (1 \03BCg/Kg) inibiu a broncoconstricção induzida pela metacolina 1 e 3 h após o tratamento. O glucagon (1 \03BCg/Kg, i.n.) impediu alterações na resistência e complacência dinâmica pulmonares promovidas pela metacolina. O antagonista do receptor do glucagon inibiu o efeito anti-espasmódico do glucagon in vitro. Ademais, esse efeito do glucagon foi abolido pela remoção epitelial. O receptor do glucagon foi expresso em pulmões e traqueias com o epitélio intacto, mas não em traqueias desepitelizadas. A pré-incubação com propranolol ou ZnPP IX não inibiu a ação anti-espasmódica do glucagon in vitro. Ambos L-NAME ou indometacina aboliram o efeito do glucagon in vitro e in vivo. A administração diária com glucagon não interferiu nos níveis circulantes de glicose. Finalmente, o tratamento com glucagon 1 h antes ou depois do desafio com OVA inibiu a hiper-reatividade das vias aéreas à metacolina. Nossos resultados mostram que o glucagon apresenta um efeito anti-espasmódico na contração do músculo liso das vias aéreas, e essa ação ocorre de forma indireta, através da ativação do seu receptor presente no epitélio com consequente liberação de NO e produtos da ativação de COX | |
| dc.description | Glucagon is a hyperglycemic hormone whose
receptor expression was detected in lungs of
mice
,
but little is known about
their
actions in this organ.
In this study, we investigated the
effect of glucagon on airway smooth muscle contractility in A/J mice and possible mechanism
involved. Bronchi and tracheas were
set up
in an isolated organ bath system, and the
contractile res
ponse to carbachol was measured in the presence or
absence of glucagon
(0.1 or 1
μ
M)
in vitro
. In some experiments, the tracheas were incubated with
antagonists of
the
glucagon receptor (des
-
His
1
-
[Glu
9
] glucagon amide; 1
μM) or β
-
adreno
ceptor
s
(propranolol
; 1
μM);
or inhibitors of
NOS (L
-
NAME; 100
μM), COX (indomet
h
acin; 10
μM) or
HO
(ZnPP IX; 10
μM), 30 min before
exposure to
glucagon. Moreover, the epithelium of
some tracheas was removed before glucagon treatment
in vitro
. The expression of glucagon
recep
tor in lungs and tracheas
with
or
without
epithelium was evaluated by Western blot. The
effect of glucagon (0.1
–
10 μg/Kg, i.n) on methacholine
-
pro
voked airway
obstruction in mice
was tested
in vivo
using noninvasive and invasive plethysmography
. In some experiments,
the mice received L
-
NAME (20 mg/Kg) or indomethacin (10 mg/Kg)
i.p.
30 min before
glucagon. A treatment with glucagon (0.1
-
10 μg/Kg, i.n. or i.p.) was performed for 7 or 14
days,
once a day,
and glucose levels were assessed 24 h a
fter the last day of treatment.
T
he
effect of glucagon on airway
hyperreactivity to methacholine on mice sensitized and
c
hallenged with OVA was
evaluated in invasive plethysmography
24 h after the last
challenged.
The animals were provoked with i.n. OVA (1
μg/μL) for 2 consecutive days and
glucagon
was administered
i.n. 1 h before or 1 or 6 h after each provocation. The treatment
with glucagon inhibited bronchus
and trachea contraction induced by carbachol
in vitro
.
The
administration of glucagon (1 μg/Kg)
inhibited methacholine
-
induced bronchoconstriction 1
and 3 h after treatment.
Glucagon (
1 μg/Kg
, i.n.)
prevented
alterations in lung resistance and
dynamic compliance promoted by methacholine.
The glucagon receptor antagonist
inhibited
the anti
-
spasmodic e
ffect of glucagon
in vitro
. Moreover, this effect of glucagon was
abrogated by
epithelial
removal.
Glucagon receptor was expressed in lungs and tracheas
with intact epithelium but not in
denuded tracheas
.
The pre
-
incubation with
propranolol
or
ZnPP
IX did not inhibit
the anti
-
spasmodic action of glucagon
in vitro
.
Either L
-
NAME or
indomethacin abrogated the effect of glucagon
in vitro
and
in vivo
. The daily administration of
glucagon did not interfere with the circulating levels of glucose.
Finally,
the treatment with
glucagon 1 h before or after challenge with OVA i
nhibited airway hyperreactivity
to
methacholine.
Our results show that glucagon presents an anti
-
spasmodic effect on airway
smooth muscle contraction
,
and this action occur
s
in an indirectly way, through activation of
its receptor present in epithelium with consequent release of
NO
and products of COX
activation. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.rights | open access | |
| dc.subject | Ciclo-Oxigenase 1 | |
| dc.subject | Glucagon | |
| dc.subject | Asma | |
| dc.subject | Óxido Nítrico | |
| dc.title | Efeito do glucagon sobre a contração da musculatura lisa das vias aéreas de camundongos A/J | |
| dc.type | Dissertation | |
