| dc.contributor | Martins Júnior, Ademir de Jesus | |
| dc.creator | Lopes, Ramon Pereira | |
| dc.date | 2021-05-26T16:52:38Z | |
| dc.date | 2021-05-26T16:52:38Z | |
| dc.date | 2020 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-26T23:12:40Z | |
| dc.date.available | 2023-09-26T23:12:40Z | |
| dc.identifier | LOPES, Ramon Pereira. Mutações relacionadas com resistência a inseticidas e diversidade de Wolbachia pipientis Hertig e Wobach,1924 em populações de Culex quinquefasciatus Say, 1823 do Brasil. 2020. 165 f. Tese (Doutorado em Biologia Parasitária) - Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2020. | |
| dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/47397 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8888059 | |
| dc.description | Culex quinquefasciatus Say, 1823 (Diptera: Culicidae), vulgarmente conhecido como pernilongo, é um mosquito amplamente distribuído em todo o território brasileiro. Esta espécie antropofílica e naturalmente infectada por Wolbachia é principal vetora de patógenos responsáveis pelo desenvolvimento de doenças como a filariose linfática e a febre do Nilo Ocidental. O manejo ambiental e o uso de inseticidas são as estratégias mais empregadas para diminuir a densidade das populações naturais desse vetor. No entanto, o uso exacerbado desses compostos tem selecionado populações resistentes em todo o mundo, diminuindo a efetividade do controle químico. Embora exista no Brasil um programa governamental bem estruturado de vigilância e monitoramento da resistência a inseticidas em Ae. aegypti, são raros os estudos envolvendo Cx. quinquefasciatus neste sentido, ainda que o controle químico exerça pressão seletiva semelhante sobre estas espécies essencialmente urbanas. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de mutações nos principais genes relacionados com resistência a inseticidas e a diversidade de Wolbachia pipientis em populações brasileiras de Cx. quinquefasciatus. Adicionamente, foi determinado o perfil de suscetibilidade a inseticidas em linhagens de laboratório de Cx. quinquefasciatus por meio de bioensaios padronizados pela OMS. Foi extraído o DNA de Cx. quinquefasciatus de duas linhagens de laboratório e de treze localidades brasileiras, cobrindo as cinco regiões do país, totalizando 744 amostras. A presença de mutações relacionadas à resistência a piretroides, organofosforados e ao biolarvicida Lysinibacillus sphaericus foi investigada por sequenciamento e diferentes métodos de genotipagem baseados em PCR, nos genes do canal de sódio regulado por voltagem (NaV), acetilcolinesterase (ace-1) e Culex quinquefasciatus maltase 1 (cqm-1). Adicionalmente, determinou-se o grupo genético de Wolbachia pipientis naquelas mesmas amostras, baseado em amplificação por PCR dos genes bacterianos wsp e ftsZ. As duas linhagens de laboratórios foram consideradas suscetíveis aos inseticidas temefós e malathion. Foram identificados 14 haplótipos para o gene NaV e 42 para o gene ace-1. A clássica mutação kdr L1014F do NaV foi observada nas populações de Boa Vista (2,2%), Manaus (1,6%), Cáceres (1,9%) e na linhagem JPA (1%). O alelo mutante ace-1 R foi observado na população de Foz do Iguaçu (3,5%). Nenhum dos alelos mutantes cqm1REC e cqm1REC-2 foram observados no gene cqm1. Todas as amostras apresentaram Wolbachia do supergrupo B, exceto alguns indivíduos (0.5%) de Caseara-TO que não estavam infectados pela bactéria. Alguns indivíduos de Recife (14,8%) e Campina Grande (45%) indicam a possibilidade de superinfeção pelos supergrupos A e B. A presença de alelos classicamente relacionados à resistência em populações de Cx. quinquefasciatus de diferentes regiões do país indica fortemente a necessidade de se implementar um programa de monitoramento de resistência a inseticidas para esse vetor. A existência de W. pipientis do supergrupo A em Cx. quinquefasciatus do Brasil surpreende e indica necessidade de maiores estudos neste sentido. | |
| dc.description | Culex quinquefasciatus Say, 1823 (Diptera: Culicidae), commonly known as the southern house mosquito, is widely distributed throughout the Brazilian territory. This anthropophilic species and naturally infected with Wolbachia is the main vector of pathogens responsible for the development of diseases such as lymphatic filariasis and West Nile fever. Environmental management and use of insecticides are the most employed strategies aiming at to decrease the density of natural populations of this vector. However, the exaggerated use of such compounds has selected resistant populations worldwide, decreasing the effectiveness of chemical control. Although there is a well-structured governmental program in Brazil for surveillance and monitoring of insecticide resistance in Ae. aegypti, studies involving Cx. quinquefasciatus in this sense are rare, even though chemical control exerts similar selective pressure over these essentially urban species. The aim of this study was to evaluate the presence of mutations in the main insecticide resistance related genes and the diversity of Wolbachia pipientis in Cx. quinquefasciatus Brazilian populations. In addition, the profile of susceptibility to insecticides in laboratory strains of Cx. quinquefasciatus was determined using WHO-standardized bioassays. The DNA of the insects was extracted from two laboratory strains and from thirteen Brazilian populations, covering the five regions of the country, totaling 744 samples. The presence of mutations related to resistance to pyrethroids, organophosphates and the biolarvicide Lysinibacillus sphaericus was investigated by sequencing and through different PCR-based genotyping methods, in their respective target genes: voltage-regulated sodium channel (NaV), acetylcholinesterase (ace-1) and Culex quinquefasciatus maltase 1 (cqm-1). Additionally, the genetic supergroup of Wolbachia pipientis was determined in those same samples, based on PCR amplification of the bacterial genes wsp and ftsZ. Both laboratory strains were considered susceptible to the insecticides temephos and malathion. The total of 14 haplotypes were identified in the NaV gene and 42 in the ace-1 gene. The classic L1014F kdr mutation was observed in the populations of Boa Vista (2.2%), Manaus (1.6%), Cáceres (1.9%) and in the JPA strain (1%). The ace-1 R mutant allele was observed in the population of Foz do Iguaçu (3.5%). Neither of cqm1REC and cqm1REC-2 mutant alleles were observed in the cqm1 gene. All samples harbored supergroup B Wolbachia, except few individuals (0.5%) from Caseara-TO, which were not infected. Some samples from Recife (14.8%) and Campina Grande (45%) indicated the superinfection, containging both supergroups A and B. The presence of alleles classically related to insecticide resistance in Cx. quinquefasciatus natural populations from different regions strongly indicates the needs of implementing an insecticide resistance monitoring program for this vector. The occurence of supergroup A W. pipientis in Brazilian Cx. quinquefasciatus is surprising and indicates the necessity of further studies in this regard. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.rights | open access | |
| dc.subject | Controle de Vetores | |
| dc.subject | Entomologia | |
| dc.subject | Culexparasitologia | |
| dc.subject | Técnicas de Genotipagem | |
| dc.subject | Controle de Vetores | |
| dc.subject | Entomologia | |
| dc.subject | Culexparasitologia | |
| dc.subject | Técnicas de Genotipagem | |
| dc.title | Mutações relacionadas com resistência a inseticidas e diversidade de Wolbachia pipientis Hertig e Wobach,1924 em populações de Culex quinquefasciatus Say, 1823 do Brasil | |
| dc.type | Thesis | |
