Molecular basis of interaction of the binary toxin of Bacillus biolarvicide shaericus with a-glucosidase from larvae culicids vectors

dc.contributorSilva Filha, Maria Helena Neves Lobo
dc.contributorDhalia, Rafael
dc.contributorMelo Neto, Osvaldo Pompílio de
dc.contributorSilva, Carlos Gustavo Regis da
dc.contributorDocena, Cássia
dc.contributorFontes, Cláudia
dc.contributorSilva Filha, Maria Helena Neves Lobo
dc.creatorMelo, Tatiany Patrícia Romão Pompílio de
dc.date2015-05-27T13:35:00Z
dc.date2015-05-27T13:35:00Z
dc.date2010
dc.date.accessioned2023-09-26T22:57:43Z
dc.date.available2023-09-26T22:57:43Z
dc.identifierMelo, Tatiany Patrícia Romão Pompílio de. Base molecular da interação da toxina binária do biolarvicida Bacillus shaericus com a-glicosidases de larvas de culicídios vetores. 2010. 136 f. Tese (Saúde pública) - Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Recife, 2010.
dc.identifierhttps://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/10521
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8885246
dc.descriptionO principal fator larvicida do Bacillus sphaericus (Bs) para culicídeos é a toxina binária (Bin), produzida sob a forma de um cristal, durante a esporulação. Esta toxina, ativada por meio da ação de proteases no lúmen intestinal, reconhece e liga-se a receptores específicos no intestino de larvas por meio de suasubunidade BinB, etapa crítica no seu modo de ação e essencial para a atividade larvicida. Os receptores em Culex pipiens, C. quinquefasciatus e Anopheles gambiae, denominados Cpm1, Cqm1, e Agm3, respectivamente, são alfa glicosidases de 66 kDa ligadas à membrana apical do epitélio intestinal por uma âncora de glicosilfosfatidilinositol (GPI). Larvas de Aedes aegypti expressam a alfaglicosidase Aam1, ortóloga ao receptor Cqm1 que, no entanto, não apresenta capacidade de ligação à toxina Bin. O principal objetivo deste trabalho foi caracterizar a base molecular da interação da toxina Bin do Bs com alfaglicosidases em larvas de culicídeos vetores. Para tal, a sequência protéica de Cqm1 foi alinhada a sequências ortólogas e parálogas de Ae. aegypti e An. gambiae, o que indicou trechos mais conservados na porção N-terminal e divergentes na porção C-terminal. A banálise funcional de fragmentos protéicos de 45 kDa da porção N-terminal de proteínas ortólogas e parálogas à Cqm1 sugeriu que o epitopo de ligação à toxina Bin está potencialmente localizado nesta região e que o estado conformacional nativo das proteínas é determinante para sua funcionalidade. Em seguida, foram avaliadas algumas características das alfa glicosidases Cqm1 e Aam1 de 66 kDa que podem estar envolvidas na sua capacidade de ligação à toxina Bin. Os resultados mostraram que as proteínas possuem diferenças estruturais e conformacionais que podem ter um papel determinante para a interação com a toxina Bin. Aanálise do padrão de glicosilação das proteínas revelou que a Aam1 posssui glicosilações em sua cadeia polipeptídica ao contrário da Cqm1 e que a ligação do receptor Cqm1 à toxina Bin não envolve N-glicanos. Na segunda parte do trabalho, foram investigados os motivos da subunidade BinB envolvidos na interação com o receptor Cqm1, através do estudo da funcionalidade de proteínas BinB mutantes com deleções nas regiões N- e C-terminal ou substituições de blocos de aminoácidos por alaninas. Os resultados obtidos indicam que o epitopo 147FQF149 da toxina é essencial a ligação ao receptor Cqm1 e que esta interação depende ainda do segmento N-terminal da BinB, compreendendo os primeiros 82 aminoácidos, uma região predita de segmentos não estruturados e de alfa hélices
dc.formatapplication/pdf
dc.languagepor
dc.publisherCentro de Pesquisas Aggeu Magalhães
dc.rightsopen access
dc.subjectAedes
dc.subjectToxinas Biológicas
dc.subjectCulex
dc.titleBase molecular da interação da toxina binária do biolarvicida Bacillus shaericus com a-glicosidases de larvas de culicídios vetores
dc.titleMolecular basis of interaction of the binary toxin of Bacillus biolarvicide shaericus with a-glucosidase from larvae culicids vectors
dc.typeThesis


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