dc.contributorMartins Junior, Ademir de Jesus
dc.contributorPavan, Márcio Galvão
dc.contributorGenta, Fernando Ariel
dc.contributorSantos, Roseli La Corte dos
dc.contributorGarcia, Gabriela de Azambuja
dc.contributorCorrêa, Ana Paula Sales de Andrade
dc.creatorSouza, Bárbara da Silva de
dc.date2022-06-16T00:01:52Z
dc.date2022-06-16T00:01:52Z
dc.date2021
dc.date.accessioned2023-09-26T22:32:23Z
dc.date.available2023-09-26T22:32:23Z
dc.identifierSOUZA, Bárbara da Silva de. Estruturação genética e distribuição de mutações kdr em populações de Aedes aegypti (Linnaeus 1762) do estado do Amapá. 2021. 67 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Parasitária) - Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2021.
dc.identifierhttps://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/53297
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8880504
dc.descriptionO mosquito Aedes aegypti é vetor competente para a transmissão dos vírus dengue, chikungunya, Zika e febre amarela. O controle químico do vetor é amplamente utilizado, mas vem sendo ameaçado pela disseminação da resistência a inseticidas (RI), caracterizando-se pela seleção de alterações no comportamento ou na fisiologia do mosquito, que fazem com que o inseticida não atinja ou não encontre seu alvo no organismo do inseto. A disseminação da RI ocorre usualmente pelo fluxo gênico entre populações, que no caso do Ae. aegypti é facilitado pela dispersão passiva de seus ovos aderidos a mercadorias. A estruturação genética das populações naturais é, portanto, um fator fundamental que facilita ou dificulta a disseminação de alelos de resistência. Entre os principais mecanismos de RI estão as alterações no gene do canal de sódio regulado por voltagem (NaV), que causam resistência ao efeito knockdown de piretroides, sendo conhecidas como mutações kdr. Populações de Ae. aegypti das localidades de Macapá e Oiapoque, no estado do Amapá, eram geneticamente distintas e apresentavam alelos kdr diferenciados, muito provavelmente devido ao baixo fluxo gênico entre essas duas populações, dificultado pelo acesso terrestre entre essas duas localidades, feito por uma única rodovia que cruza a densa Floresta Amazônica. Não se conhecia, no entanto, como seria a estruturação genética entre as populações de localidades ao longo daquela rodovia e, tampouco sobre ocorrência de mutações kdr. Por isso, avaliamos a frequência das principais mutações kdr em três sítios polimórficos (V410L, V1016I e F1534C) no gene NaV de populações de Ae. aegypti de seis localidades do estado do Amapá (Oiapoque, Calçoene, Porto Grande, Ferreira Gomes, Tartarugalzinho e Macapá), através de genotipagem por qPCR em tempo real. Adicionalmente, investigamos a diversidade e a estruturação genética destas populações via genotipagem de 12 loci de microssatélites. Os alelos kdr R1 (mutante no sítio 1534) e R2 (mutante nos três sítios) foram observados nas seis populações, sendo que a de Oiapoque apresentou a maior frequência do kdr R2, enquanto o kdr R1 foi mais frequente na de Macapá. Genótipos kdr raros em demais regiões do Brasil, sugestivos de duplicações gênicas, foram encontrados em Ae. aegypti de Oiapoque e Calçoene. As análises de microssatélites mostraram baixa ou moderada diferenciação genética par-a-par, sendo que Oiapoque foi a população geneticamente mais distinta das demais e formou praticamente um único grupo genético em uma das análises de estruturação genética. Análise de Componentes Principais (DAPC) também sugeriu a população de Calçoene geneticamente diferenciada das demais, enquanto as outras populações mostraram-se mais similares entre si, sugerindo alto fluxo gênico entre elas. Ainda que a população de Oiapoque seja a mais diferenciada e estruturada, nosso estudo indica que há fluxo gênico entre esta e as demais ao longo da estrada BR-156 (AP), colaborando com a disseminação de alelos vindos da população da Guiana Francesa. Idealmente, medidas de controle químico do vetor devem ser pensadas conjuntamente entre as autoridades de ambos os lados da fronteira binacional
dc.descriptionThe Aedes aegypti mosquito is a competent vector for the transmission of dengue, chikungunya, Zika and yellow fever viruses. Chemical control of the vector is widely used but has been threatened by the spread of insecticide resistance (IR), characterized by the selection of changes in the behaviour or physiology of the mosquito, which make the insecticide not reach or not find its target in the insect's organism. The spread of IR usually occurs through gene flow between populations, which in the case of Ae. aegypti is facilitated by the passive dispersion of its eggs attached to commodities. The genetic structure of natural populations is, therefore, a fundamental factor that facilitates or hinders the dissemination of resistance alleles. Among the main mechanisms of IR are alterations in the voltage-regulated sodium channel (NaV) gene, which cause resistance to the knockdown effect of pyrethroids, known as kdr mutations. Populations of Ae. aegypti from the localities of Macapá and Oiapoque, in the state of Amapá, were genetically distinct and had different kdr alleles, most likely due to the low gene flow between these two populations, hampered by land access between these two locations, made by a single road that crosses the dense Amazon Forest. However, it was not known how the genetic structure would be among the populations of localities along that highway, nor about the occurrence of kdr mutations. Therefore, we evaluated the frequency of the main kdr mutations at three polymorphic sites (V410L, V1016I and F1534C) in the NaV gene of populations of Ae. aegypti from six locations in the state of Amapá (Oiapoque, Calçoene, Porto Grande, Ferreira Gomes, Tartarugalzinho and Macapá), using real-time qPCR genotyping. Additionally, we investigated the diversity and genetic structure of these populations via genotyping of 12 microsatellite loci. The alleles kdr R1 (mutant at site 1534) and R2 (mutant at all three sites) were observed in the six populations, with Oiapoque showing the highest frequency of kdr R2, while kdr R1 was more frequent in Macapá. Rare kdr genotypes in other regions of Brazil, suggestive of gene duplications, were found in Ae. aegypti from Oiapoque and Calçoene. Microsatellite analysis showed low or moderate pair-by-pair genetic differentiation, with Oiapoque being the most genetically distinct population from the others and forming practically a single genetic group in one of the genetic structuring analyses. Principal Component Analysis (DAPC) also suggested the population of Calçoene genetically differentiated from the others, while the other populations were more like each other, suggesting high gene flow between them. Although the population of Oiapoque is the most differentiated and structured, our study indicates that there is gene flow between it and the others along the BR-156 (AP) road, collaborating with the dissemination of alleles coming from the population of French Guiana. Ideally, chemical vector control measures should be devised jointly between authorities on both sides of the binational border
dc.formatapplication/pdf
dc.languagepor
dc.rightsopen access
dc.subjectResistência
dc.subjectPiretróides
dc.subjectMicrossatélites
dc.subjectGenética de populações
dc.subjectMarcadores moleculares
dc.subjectAedes
dc.subjectPiretrinas
dc.subjectRepetições de Microssatélites
dc.subjectGenética Populacional
dc.subjectMarcadores Genéticos
dc.titleEstruturação genética e distribuição de mutações kdr em populações de Aedes aegypti (Linnaeus 1762) do estado do Amapá
dc.typeDissertation


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