| dc.contributor | Sousa, Taís Nóbrega de | |
| dc.contributor | Brito, Cristiana Ferreira Alves de | |
| dc.contributor | Sousa, Taís Nóbrega de | |
| dc.contributor | Monte Neto, Rubens Lima do | |
| dc.contributor | Quaresma, Patrícia Flávia | |
| dc.creator | Costa, Gabriel Luíz. | |
| dc.date | 2017-06-26T18:03:43Z | |
| dc.date | 2017-06-26T18:03:43Z | |
| dc.date | 2017 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-26T21:53:26Z | |
| dc.date.available | 2023-09-26T21:53:26Z | |
| dc.identifier | COSTA, Gabriel Luíz. Variação de Número de Cópias em Genes Relacionados à Resistência aos Antimaláricos em Isolados de Plasmodium spf. do Brasil. 2017. 63 f. Dissertação (Mestrado em Ciências – concentração em Biologia Celular e Molecular, Genética e Bioinformática)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Instituto René Rachou, Fundação Oswaldo Cruz, Belo Horizonte, 2017 | |
| dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/19515 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8873947 | |
| dc.description | Um dos maiores desafios do controle da malária é a
resistência do parasito aos
antimaláricos. A biologia molecular tem permitido a c
ompreensão desse fenótipo
com o estudo de marcadores associados a ela, tais c
omo o Polimorfismo de Base
Única (SNP) e o Polimorfismo de Variação de Número de
Cópias Gênicas (CNV).
Alterações gênicas atribuídas ao CNV podem levar a alt
erações fenotípicas no
parasito, conferindo resistência ou suscetibilidade
aos antimaláricos. Sua presença
foi relacionada com a falha terapêutica a drogas com
o cloroquina (CQ) e
mefloquina (MQ) em diversas regiões do mundo. Os genes
pfmdr1
e
pfgch1
de
P.
falciparum
e
pvmdr1
de
P. vivax
são relacionados com resistência a diferentes
fármacos. Entretanto, no Brasil poucos estudos carac
terizaram esses genes quanto
à presença de CNVs, sendo que sua maioria investigou
a diversidade genética
associada aos SNPs. O objetivo deste estudo foi inves
tigar a presença de CNV nos
genes
pfmdr1
e
pfgch1
de
P. falciparum
e
pvmdr1
e
pvcrt-o
de
P. vivax
, assim
como SNPs nos genes
pfcrt
e
pfmdr1
de
P. falciparum
. O CNV foi determinado por
qPCR utilizando sondas de hidrólise e os SNPs por PCR-RFL
P. As amostras foram
coletadas entre 2002 a 2012, em 3 diferentes estado
s brasileiros – Mato Grosso
(n=31), Rondônia (n=27) e Amapá (n=10). As 31 amostr
as analisadas de
P.
falciparum
apresentaram cópia única para
pfmdr1
e
pfgch1
, apesar do histórico de
resistência do parasito a vários antimaláricos util
izados ao longo do tempo no
Brasil. Entretanto, um importante SNP em
pfcrt
(K76T), relacionado com resistência
à CQ, foi identificado em todas as amostras analisa
das. Nesse estudo, também
foram analisados 38 isolados de
P. vivax
, sendo reportado a amplificação gênica
em 7 (18%) amostras para
pvmdr1.
No sudoeste asiático altas taxas de CNV em
pvmdr1
foram reportadas (38%), sendo relatado por um único
estudo no Brasil
(0,9% de amplificação). Um resultado importante des
se estudo foi a observação,
pela primeira vez, da amplificação de
pvcrt-o
.
Embora estudos anteriores o
associem com resistência e casos graves da doença, n
enhum avaliou a presença
de CNV em
pvcrt-o
. Este estudo é um dos primeiros a avaliar a presen
ça de CNV
nos genes
pvmdr1
,
pvcrt-o
e
pfgch1
no Brasil, assim como estudar a distribuição de
CNV no mundo através de uma revisão sistemática. | |
| dc.description | FAPEMIG | |
| dc.description | CNPq | |
| dc.description | CAPES | |
| dc.description | Fundação Oswaldo Cruz | |
| dc.description | One of the greatest challenges on malaria control is
the parasite resistance to
antimalarials.
Molecular genotyping aims to identify and to monitor
genetic markers
related to parasite resistance, as single nucleotide
polymorphisms (SNP) and copy
number variation (CNV). Genetic alterations related
to CNV could lead to
phenotypic alterations in parasite, conferring resis
tance or susceptibility to
antimalarials. The presence of CNV was identified e r
elated with therapeutic failure
to drugs like chloroquine and mefloquine in different
regions of the world. The
mdr1
and
gch1
genes of
P. falciparum
and
mdr1
of
P. vivax
are related with resistance,
however in Brazil few studies have characterized these
genes in relation to CNV,
being more associated with SNPs. The objective of this
project was investigate the
presence of CNV in
pfmdr1
and
pfgch1
genes and
pvmdr1
and
pvcrt-o
, as well as
evaluate SNP on
mdr1
and
crt
genes of
P. falciparum.
The CNV was estimated by
qPCR using the
TaqMan Universal PCR Master Mix
(Applied Biosystems) system
and SNPs was assessed by RFLP-PCR. The samples comprise
a period between
2002 to 2012 from 3 different areas of Brazil – Mato
Grosso (n=31), Rondônia
(n=27) and Amapá (n=10). All 31 samples analyzed to
P. falciparum
showed no
amplification to
mdr1
and
gch1
genes. However, an important SNP on
crt
gene
(K76T), related to chloroquine resistance, was observe
d. Despite the resistance
history in Brazil, in this study the CNV was not prese
nt on the
P. falciparum
genes.
To the 38
P. vivax
isolates, amplification was observed in 7 samples t
o
mdr1
gene e
1 to
crt-o
. The change on the therapeutic scheme could be rela
ted to the reversion
of the genetic amplification genotype, with the withdra
wal of drug with historic of
resistance, as chloroquine. High rates of CNV are obse
rved in Southeast Asia
countries (reaching 38%), but in Brazil just one stud
y reported a low rate of
amplification (0,9%). For the first time, the prese
nce of CNV on
pvcrt-o
was reported
in Brazilian samples. Other studies have associated
this gene with resistance and
severe cases, but none evaluated the association of
CNV and this outcome. This
study is one of the first to evaluate CNV on
pvmdr1
,
pvcrt-o
and
pfgch1
in Brazil, as
well as to evaluate the CNV distribution in the world
through a systematic review. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.rights | open access | |
| dc.subject | malária | |
| dc.subject | Plasmodium vivax | |
| dc.subject | Plasmodium falciparum | |
| dc.subject | resistência às drogas | |
| dc.subject | variação do número de cópias gênicas | |
| dc.subject | malaria | |
| dc.subject | Plasmodium vivax | |
| dc.subject | plasmodium falciparum | |
| dc.subject | drug resistance | |
| dc.subject | copy number variation | |
| dc.subject | Malária | |
| dc.subject | Plasmodium | |
| dc.subject | Resistência a Medicamentos | |
| dc.title | Variação de Número de Cópias em Genes Relacionados à Resistência aos Antimaláricos em Isolados de Plasmodium spp. do Brasil | |
| dc.type | Dissertation | |
