Selective culture media for MF yeast counts to monitor pollution in Lake Juturnaiba, Rio de Janeiro

dc.contributorSilva, Dalton Marcondes
dc.contributorHagler, Allen Norton
dc.creatorCarneiro, Marcos Tavares
dc.date2018-01-31T13:41:42Z
dc.date2018-01-31T13:41:42Z
dc.date2011
dc.date.accessioned2023-09-26T20:54:07Z
dc.date.available2023-09-26T20:54:07Z
dc.identifierCARNEIRO, Marcos Tavares. Desenvolvimento de meios seletivos para contagem de leveduras em membrana filtrante para monitorar a poluição no Lago Juturnaíba, Rio de Janeiro. 2011. 109 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2011.
dc.identifierhttps://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/24273
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8865875
dc.descriptionOs múltiplos e intensos usos da água têm causado crescente poluição e impactos nos ecossistemas aquáticos. Considerando que os coliformes termotolerantes refletem a poluição fecal, e os parâmetros químicos a qualidade imediata da água, seria desejável usá-los juntamente a indicadores complementares. O uso da contagem de leveduras como bioindicador da qualidade da água tem sido proposto. A estrutura de suas comunidades muda de acordo com os fatores ambientais, incluindo os impactos antrópicos oriundos dos efluentes domésticos e das atividades agrícolas. No entanto, as contagens de leveduras pelos métodos de cultivo são dificultadas pela competição com os bolores, além do que, as técnicas que reduzem os bolores, também afetam as leveduras. Buscamos desenvolver um método para contagem de leveduras em amostras de água, através dos meios BIL(Base de isolamento de leveduras) seletivos, e avaliar preliminarmente o potencial das leveduras isoladas como bioindicadoras da qualidade da água. Coletamos 46 amostras de 08 pontos no Lago de Juturnaíba/RJ. Foram aferidos os parâmetros temperatura, pH, OD, Saturação de OD, SDT, condutividade e DBO5. Analisamos leveduras utilizando o método de membrana filtrante, incubada sobre suporte, com novas variações seletivas da Base de Isolamento de Leveduras (BIL) em caldo, suplementada com diferentes fontes de Carbono e inibidores. Procedemos as contagens de UFC/100mL e isolamos os diferentes morfotipos observados. Procedemos a identificação polifásica das culturas. Foram feitas as análises do NMP de Escherichia coli, Coliformes Totais e Enterococcus sp. e foram realizadas análises qualitativas das bactérias potencialmente patogênicas. Buscamos relacionar as médias geométricas dos resultados microbiológicos e as médias aritméticas dos dados físico-químicos através da correlação linear de Pearson e de Regressão Múltipla. Obtivemos contagens significativas de leveduras de até mais que 10.000/100mL nos pontos-controle de águas limpas e águas poluídas na região. Foram usados como inibidores Cicloeximida, etanol ou corante verde-bromo-cresol e como fonte de carbono glicose ou galactose. Não houve interferências significativas de bolores quando usamos esses meios seletivos. Duzentos e trinta e cinco culturas de leveduras foram isoladas e identificadas por taxonomia convencional e vinte e cinco culturas representativas tiveram suas identificações confirmadas pelo seqüenciamento da região D1/D2 da subunidade maior do rDNA. Muitas leveduras encontradas são de prováveis novas espécies ou novos biotipos de espécies conhecidas. As leveduras prevalentes no lago foram Candida guilliermondii ou linhagem similar de Candida famata que foram seletivamente favorecidas pelo meio BIL-galactose cicloeximida. O meio BIL-etanol favoreceu Candida krusei e outras espécies anamorfas de Pichia, que foram mais frequentes nos pontos de maior poluição doméstica. Os meios BIL glicose-cicloeximida e BIL verde-bromocresol favoreceram o isolamento de maior diversidade de espécies. A alta frequência de ascomycetes isolados neste estudo foi consistente com sua associação a águas de ambientes poluídos por matéria orgânica. Um aumento na frequência de basidiomycetes observado depois das chuvas, pode ter sido relacionado à influência do run-off. O isolamento das espécies relacionadas a diferentes tipos de poluição sugere o uso destes meios no estudo de leveduras como indicador de eutroficação por fontes diversas, tais como as atividades agrícolas e o lançamento de efluentes domésticos.
dc.descriptionMultiple and intensive use of water supplies cause increased impact of pollution on aquatic ecosystems. Since the fecal coliform reflect fecal pollution, and chemical parameters of immediate water quality, it would be desirable use these with complimentary indicators. The use of yeast counts as bioindicators of water quality has been proposed. Their community structures change in accord with environmental factors including human impact from agricultural and domestic wastes. Unfortunately yeast counts by cultivation methods are complicated by competition with mold growth and factors that reduce mold growth also have impact on yeasts. We intended developed a count yeast method in water samples through select yeast isolation basal medium (BIL), and to undergo a preliminary evaluation the isolated yeast potential as bioindicator. 46 water samples were collected from from 8 sites with in and near Lake Juturnaíba/RJ and pH, DO, DO saturation, Dissolved solids, conductivity, and BOD5 were determined. The membrane filter method used with selective variations of a yeast isolation basal medium (BIL) on cellulose pads, did allow significant yeast counts of up to over 10,000 / 100ml to be made from water of Lake Juturnaíba / RJ and clean and polluted control waters from the same region. Cyclohehimide, ethanol or the dye brom-cresol-green were used as inhibitors and galactose as a selective carbon source. There was no significant interference from molds when using these selective media. Two hundred and thirty five yeast cultures were isolated and identified by conventional taxonomy and 25 representative cultures had identity confirmed by sequencing the D1/D2 region of the large subunit rDNA. MPN of Escherichia coli, total coliforms and enterococfcus were determined and P/A of some potentially pathogenic bacteria. Correlations were determined between geometric means of microbial counts and arithmetic means of other parameters by Pearson’s and multi step regression analysis. Statistically significant yeast counts of up to 10,000/ 100mL were obtained from sites with various levels of eutrophication from agricultural runoff and domestic sewage contamination. Many of the yeasts were found to be probable new species or new biotypes of known species. The prevalent yeasts from the lake sites were Candida guilliermondii or similar Candida famata strains that were selectively favored by the BIL-galactose cyclohehimide medium. The BIL-ethanol medium favored Candida krusei and other anamorphs of Pichia species that were more frequent in sites with more domestic pollution. The BIL glucose-cyclohehimide and BIL brom-cresol-green media favored isolation of more species diversity. The high frequency of ascomycetous yeasts isolated in this study was consistent with their association with aquatic environments polluted by organic matter. An increased frequency of basidiomycetes observed after rains may have been related influence from run-off. The isolation of species related to different types of pollution suggests the use of these media in the study of yeasts as indicators of eutrophication from different sources such as agricultural and domestic waste.
dc.formatapplication/pdf
dc.languagepor
dc.rightsopen access
dc.subjectQualidade da Água
dc.subjectMeios Seletivos
dc.subjectLeveduras
dc.subjectBioindicadores
dc.subjectPoluição
dc.subjectSelective Media
dc.subjectYeast
dc.subjectWater Quality
dc.subjectBioindicators
dc.subjectPollution
dc.subjectQualidade da Água
dc.subjectLeveduras
dc.subjectIndicadores Biológicos
dc.subjectPoluição de Lagos e Barragens/análise
dc.titleDesenvolvimento de meios seletivos para contagem de leveduras em membrana filtrante para monitorar a poluição no Lago Juturnaíba, Rio de Janeiro
dc.titleSelective culture media for MF yeast counts to monitor pollution in Lake Juturnaiba, Rio de Janeiro
dc.typeDissertation


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