| dc.contributor | Andrade, Daniela Rodrigues | |
| dc.contributor | Trindade, Soraya Castro | |
| dc.contributor | Gonçalves, Marilda de Souza | |
| dc.contributor | Grassi, Maria Fernanda Rios | |
| dc.contributor | Cardoso, Thiago Marconi de Souza | |
| dc.contributor | Andrade, Jorge Clarêncio de Souza | |
| dc.creator | Andrade, Daniela Rodrigues | |
| dc.date | 2017-02-06T19:28:29Z | |
| dc.date | 2017-02-06T19:28:29Z | |
| dc.date | 2016 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-26T20:08:06Z | |
| dc.date.available | 2023-09-26T20:08:06Z | |
| dc.identifier | ANDRADE, Daniela Rodrigues. Caracterização fenotípica e funcional das células T CD4+ e CD8+ Vβ12 na resposta imune em paciente com Leishmaniose Cutânea localizada. 88 f. il. Tese (Doutorado em Patologia) - Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Gonçalo Moniz, Salvador, 2016. | |
| dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/17684 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8849351 | |
| dc.description | As leishmanioses constituem um complexo de doenças causada pelo protozoário intracelular,
do gênero Leishmania, sendo a resposta imune celular essencial para controle, eliminação e
proteção contra a infecção. A teoria clonal da imunidade celular propõe que as respostas
imunológicas são estabelecidas através do aumento na frequência de clones específicos ao
antígeno. Para avaliar a resposta das células T à infecção por Leishmania, investigamos, por
citometria de fluxo, a expressão de cadeias Vβ de receptores de células T (TCRs), estado de
ativação, capacidade de adesão ao endotélio e potencial funcional de clones específico. Em um
grupo de pacientes com Leishmaniose Cutânea Localizada (LCL), avaliamos diferentes
subpopulações de células T através da expressão da região Vβ, no sangue periférico e na biópsia
da lesão. Utilizamos células mononucleares de sangue periférico (CMSPs), de pacientes LCL
e controles saudáveis, nas quais avaliamos, ex vivo, a expressão de moléculas de ativação
(CD25, CD69 e HLA-DR), adesão (LFA-1, VLA-4 e CD62L), co-estimulatória (CD27 e CD28)
e marcadores de memória (CCR7, CD45RA, CD45RO). In vitro, as CMSPs de pacientes com
LCL foram estimuladas com SLA para avaliar a expansão do clone Vβ12 e a produção de
citocinas intracelulares (IL-2, IFN-y e TNF). Nossos resultados mostram: (1) diminuição no
sangue das células T CD4+ que expressam Vβ2, Vβ5, Vβ12 e CD8+ Vβ5, Vβ12, Vβ14 nos
pacientes com LCL quando comparado com os controles saudáveis; (2) um perfil de ativação
prévia de células T CD4+ Vβ2, Vβ5 e CD8+ Vβ5, Vβ14, com expressão mais elevada HLADR,
enquanto que o clone Vβ12 apresentou diferentes níveis de ativação; (3) uma correlação
positiva entre as frequências das células T CD4+ e CD8 Vβ12+ ativadas e o tamanho das lesões;
(4) alta expressão de moléculas de adesão, indicando direcionamento das células T CD4+ e
CD8+ expressando Vβ12 para o local da lesão, confirmado através da (5) alta freqüência de
células Vβ12 CD62Llow no sangue dos pacientes quando comparado aos controles; (6) os
pacientes apresentaram frequência mais elevada de células CD4+ Vβ12 com fenótipo efetor
(CD45RA+CCR7-; CCR7-CD45RO+CD28-; CD45RO-CD27-) enquanto as células CD8+ Vβ12
apresentaram o fenótipo de memória efetora (CD45RA-CCR7-, CCR7-CD45RO-CD28-,
CD45RO+CD27-), esse perfil apresenta correlação positiva entre a frequência de células no
sangue, com o tamanho da lesão; (7) CMSPs de pacientes com LCL, estimuladas com SLA,
apresentaram aumento na frequência das células T CD4+ e CD8+ expressando Vβ12; (8) in
vitro, as células T CD4+ Vβ12 produziram predominantemente IFN-y, enquanto células CD8+
Vβ12 produzem IFN-y e TNF; (9) Ambas as células Vβ12 têm uma subpopulação dupla
positiva para IFN-y e TNF. O Vβ12 contribui para a resposta inflamatória através produção de
IFN-γ e TNF, assim como para manutenção da lesão devido a presença das células T CD8+ de
memória efetora com capacidade de produção simultânea de IFN-γ e TNF | |
| dc.description | Leishmaniasis is a desease caused by infection with the Leishmania protozoan parasite. The
cellular immune response is essential for controlling, eliminating and protection of the
Leishmania infection. The clonal theory of cellular immunity proposes that immunological
responses are established by increasing the frequency of antigen-specific clones. In order to
measure the host T cell response to Leishmania infection, we have investigated by flow
cytometry, the expression of Vβ chains of T-cell receptors (TCRs), activation state, adhesion
to endothelium of capacity and functional potential of specific T. In a group of localized
cutaneous leishmaniasis (LCL) patients, we evaluated different T cell subpopulations as
identified by their Vβ region expression, in peripheral blood and biopsy. We used peripheral
blood mononuclear cells (PBMCs), from CL patients and healthy volunteers, in which we
evaluate, ex vivo, the expression of activation molecules (CD25, CD69 and HLA-DR), adhesion
(LFA-1, VLA-4 and CD62L), co-stimulatory (CD27 and CD28) and memory markers (CCR7,
CD45RA, CD45RO). In vitro, PBMCs from LCL patients were stimulated with SLA to
determine clone Vβ12 expansion and the production of intracellular cytokines (IL-2, IFN-γ and
TNF). Our results demonstrate: (1) an decrease in blood CD4+ T cells expressing Vβ2, Vβ5,
Vβ12 and in CD8+ Vβ5, Vβ12, Vβ14 in CL compared to controls; (2) a profile of previous
activation of CD4+ Vβ2, Vβ5 and CD8+ Vβ5, Vβ14 positive T cells, with higher expression of
HLA-DR, while Vβ12 clone has different levels of activation; (3) a positive correlation between
higher frequencies of CD4+ and CD8 Vβ12+ T cells in biopsia and size of the lesions; (4) high
expression of adhesion molecules, indicate homing of CD4+ and CD8+ T cells expressing Vβ12
to the lesion site, confirmed (5) high frequency of Vβ12 CD62Llow cells; (6) patients exhibited
significant high numbers of phenotype effector CD4+ Vβ12 (CD45RA+CCR7-; CCR7-
CD45RO+CD28-; CD45RO-CD27-) and memory effector CD8+ Vβ12 (CD45RA-CCR7-;
CCR7-CD45RO-CD28-; CD45RO+ CD27-); a positive correlation between higher frequencies
of effector CD4+ Vβ12 and memory effector CD8+ Vβ12 T cells, in blood and size of the
lesions; (7) Stimulated PBMCs from LCL patients with SLA induced increase in CD4+ and
CD8+ T cells expressing Vβ12; (8) CD4+ Vβ12 T cells are prodominantly producing IFN-γ,
while the CD8+ cells produce both IFN-γ and TNF; (9) Both Vβ12 cells have a positive double
subpopulation for IFN-γ and TNF. Vβ12 clone expansion points to CD4+ and CD8+ T clone
cells in response to SLA stimulation, associated with phenotypic characterization and cytokine
production, we suggest that the CD4+ and CD8+ Vβ12 T cells are involved in the long-term
inflammatory response against Leishmania. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.rights | open access | |
| dc.subject | Leishmaniose Cutânea | |
| dc.subject | Linfócitos T | |
| dc.subject | Receptores de Antígenos de Linfócitos T alfa-beta | |
| dc.subject | Receptores CCR7 | |
| dc.subject | Antígenos CD45 | |
| dc.subject | Cutaneous Leishmaniasis | |
| dc.subject | T-Lymphocytes | |
| dc.subject | Alpha-beta T-Lymphocyte Antigen Receptors | |
| dc.subject | CCR7 Receptors | |
| dc.subject | CD45 Antigens | |
| dc.title | Caracterização fenotípica e funcional das células T CD4+ e CD8+ Vβ12 na resposta imune em paciente com Leishmaniose Cutânea localizada. | |
| dc.type | Thesis | |
