dc.creatorDíaz-Ferreira,Natalia Jazmín
dc.creatorMiranda-Echagüe,Mabel Rocío
dc.creatorMercado Amarilla,María Alexandra
dc.creatorMartínez Pereira,Iara Magaly
dc.creatorValenzuela Cáceres,Adriana Beatriz
dc.creatorMendoza Torres,Laura Patricia
dc.creatorMongelós Dacunte,Pamela Esther
dc.date2022-08-01
dc.date.accessioned2023-09-25T15:53:39Z
dc.date.available2023-09-25T15:53:39Z
dc.identifierhttp://scielo.iics.una.py/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1812-95282022000200013
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8832447
dc.descriptionRESUMEN El cáncer de cuello uterino es el cuarto cáncer más frecuente en mujeres en el mundo y a nivel mundial, el VPH 16 se encuentra presente en aproximadamente el 60% de los casos. A la fecha, las variantes de VPH 16 se clasifican en 4 linajes y 16 sublinajes asociándose algunas variantes con severidad de lesión. La secuenciación de la región LCR y del gen E6 es utilizada para la clasificación de variantes. Por ello, el objetivo fue optimizar 2 PCRs convencionales para detectar la región LCR y una PCR para el gen E6. Para ello, se utilizaron muestras positivas para VPH 16, cebadores específicos para la región LCR y el gen E6. Se probaron las reacciones a diferentes temperaturas de anillamientos. La concentración de MgCl2, dNTP y cebadores fueron determinadas siguiendo las recomendaciones del fabricante de la enzima ADN polimerasa utilizada. Para la amplificación de la región LCR y el gen E6 del VPH 16, se observaron mejores resultados a una temperatura de anillamiento de 57°C y 50°C, respectivamente. La concentración de MgCl2 utilizada en ambas reacciones fue de 1,5mM, la de dNTP 0,2mM y la de cebadores 0,2uM. La optimización de la reacción de PCR permitirá obtener amplicones aptos para secuenciación, a fin de determinar las variantes génicas y posteriormente evaluar funcionalidad y actividad transcripcional que puedan estar relacionadas con la patogénesis cervical.
dc.formattext/html
dc.languagees
dc.publisherInstituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud
dc.relation10.18004/mem.iics/1812-9528/2022.020.02.13
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.sourceMemorias del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud v.20 n.2 2022
dc.subjectVPH16
dc.subjectPCR
dc.subjectLCR/E6
dc.titleOptimización de una técnica de PCR convencional para la amplificación de la región LCR y el gen E6 del virus del papiloma humano tipo 16
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/article


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