| dc.contributor | Leite, Luciana Cezar de Cerqueira [UNESP] | |
| dc.contributor | Rofatto, Henrique Krambeck [UNESP] | |
| dc.contributor | Universidade Estadual Paulista (Unesp) | |
| dc.creator | Balbino, Bianca [UNESP] | |
| dc.date | 2015-03-23T15:06:13Z | |
| dc.date | 2015-03-23T15:06:13Z | |
| dc.date | 2011 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-12T03:24:13Z | |
| dc.date.available | 2023-09-12T03:24:13Z | |
| dc.identifier | BALBINO, Bianca. Expressão de SmNPP5a de Schistosoma mansoni em Pichia pastoris. 2011. 1 CD-ROM. Trabalho de conclusão de curso (bacharelado - Ciências Biomédicas) - Universidade Estadual Paulista, Instituto de Biociências de Botucatu, 2011. | |
| dc.identifier | http://hdl.handle.net/11449/118162 | |
| dc.identifier | 000700960 | |
| dc.identifier | balbino_b_tcc1_botib.pdf | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8767620 | |
| dc.description | A esquistossomose é causada pelo Schistosoma mansoni e é considerada uma importante doença parasitária que afeta mais de 200 milhões de pessoas em países em desenvolvimento. Estima-se ainda que aproximadamente 600 milhões de pessoas vivam em áreas de risco e que o número de mortes por ano devido a esta parasitose chegue a 200.000. O tratamento existente hoje é eficiente, mas não previne contra re-infecção e contra as formas jovens dos parasitas. O desenvolvimento de uma vacina utilizando antígenos do parasita produzidos de modo recombinantes é o anseio para o controle da esquistossomose. A fosfodiesterase-5 (SmNPP-5a) é uma enzima presente na interface parasita-hospedeiro e acessível ao sistema imune, sendo portanto considerada um potencial candidato vacinal, sua avaliação se faz necessária. A obtenção de uma SmNPP-5a recombinante enzimaticamente ativa é um passo fundamental no processo de avaliação da sua capacidade protetora e determinação da sua função fisiológica para o parasita. Utilizando o sistema de expressão baseados em leveduras metilotróficas, Pichia pastoris, a proteína recombinante pode ser expressa com as modificações pós traducionais necessárias para ter sua estrutura original mantida, característica fundamental para se obter uma proteína enzimáticamente ativa. Para clonagem e expressão da proteína recombinante utilizamos o vetor pPICZαA, pois este possui um sistema de expressão baseado no promotor álcool oxidase (AOX1 e AOX2). Ele possui ainda, a capacidade de adicionar um peptídeo sinal e uma cauda de histidina, com objetivo de secretar a proteína expressa e facilitar sua purificação, respectivamente. A triagem e confirmação dos clones positivos foram feitas por PCR. A análise das amostras de sobrenadantes coletadas com 24, 48 e 72h de estímulo com metanol foi feita por SDS-PAGE e Western blot para verificação da expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Estadual Paulista (Unesp) | |
| dc.rights | Acesso aberto | |
| dc.source | Aleph | |
| dc.subject | Esquitossomose | |
| dc.subject | Schistosoma mansoni | |
| dc.subject | Expressão gênica | |
| dc.subject | Reação em cadeia de polimerase | |
| dc.title | Expressão de SmNPP5a de Schistosoma mansoni em Pichia pastoris | |
| dc.type | Trabalho de conclusão de curso | |
