| dc.description.abstract | O presente estudo visa à adaptação de ensaios imunoenzimáticos comerciais de diagnóstico da
hepatite C para uso em amostras de sangue coletado em papel de filtro (SCPF). Foram coletadas
amostras pareadas de soro e SCPF de 411 indivíduos com média de idade de 40 anos,
provenientes de banco de sangue e três unidades de saúde. As amostras foram submetidas a dois
ensaios imunoenzimáticos (EIEs) para detecção de anticorpos anti-HCV: HCV Ab, Radim (Itália)
e ETI-AB-HCVK-4, DiaSorin (Itália); e a dois EIEs para detecção simultânea de antígeno core
do HCV e anticorpos anti-HCV, Monolisa
TM
HCV Ag-Ab ULTRA, Bio-Rad (França) e Murex
HCV Ag/Ab Combination, Abbott (África do Sul). A detecção de anti-HCV e simultânea de
antígeno e anticorpos anti-HCV em amostras de soro foi feita conforme recomendações dos
fabricantes, e em SCPF foram avaliados os parâmetros, tampão de eluição, volumes de amostra,
de diluente de amostra e de conjugado, tempo de incubação da amostra e valor do ponto de corte
(PC). Após otimização desses parâmetros foram determinados os valores de sensibilidade (S),
especificidade (E), concordância (valor de kappa), limite de detecção do teste, valores preditivos
positivo (VPP) e negativo (VPN), precisão intraensaio e interensaio. A estabilidade das amostras
de SCPF foi avaliada em diferentes condições ambientais (22-26ºC, 2-8°C e -20°C). Como
resultado, o tampão PBS/BSA 0,5% foi selecionado para eluição das amostras de SCPF e
estabelecido um aumento no volume de amostra para todos os fabricantes. Os tempos de
incubação e os volumes de conjugado seguiram a recomendação dos fabricantes. Para o EIE
HCV Ab os valores determinados foram S = 97,50%, E = 99,46%, kappa (k)= 0,959, VPP =
64,59% e VPN = 99,97%, para uma prevalência de doença de 1% na população. Para o EIE ETI-AB-HCVK-4, o PC foi estabelecido pela curva ROCe observou-se S = 88,89%, E = 98,89%, k=
0,875, VPP = 44,71% e VPN = 99,89%. O PC do EIE Monolisa
TM
HCV Ag-Ab ULTRA foi
obtido pela curva ROCe verificou-se S = 95,12%, E =100%, k= 0,959, VPP = 100% e VPN =
99,95%. O PC para o EIE Murex HCV Ag/Ab Combinationfoi determinado pela média dos
valores de densidade ótica (D.O.) das amostras de SCPF correspondentes àquelas de soro
negativas no teste, acrescido de três desvios padrão proporcionando S = 78,05%, E = 99,43%, k=
0,838, VPP = 58,04% e VPN = 99,78%. O limite de detecção mostrou reatividade até a diluição
de 1/10.000 para EIE HCV Ab e EIE ETI-AB-HCVK-4 e até 1/1.000 com EIE Monolisa
TM
HCV
Ag-Ab ULTRA e EIE Murex HCV Ag/Ab Combination. Os resultados das amostras de SCPF
obtiveram erro total inferior a 17% e as mesmas mantiveram-se estáveis nas diferentes condições de armazenamento por 60 dias. Os resultados obtidosnos EIE HCV ab e EIE Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA mostraram-se mais concordantes com os observados com as amostras de soro, indicando melhor desempenho desses ensaios em amostras de SCPF. | |
