Investigação de hepatite B oculta e de torque teno vírus em pacientes com hepatite C crônica com e sem carcinoma hepatocelular

Abstract

O carcinoma hepatocelular (CHC) é o sexto câncer mais comum em todo o mundo e a segunda principal causa de mortalidade relacionada ao câncer. Devido ao curto tempo de evolução, o tumor é geralmente detectado em um estágio avançado, aumentando a taxa de mortalidade deste câncer. Vários estudos têm sugerido que o desenvolvimento do CHC é um processo influenciado por fatores herdados e adquiridos. Os principais fatores etiológicos para o desenvolvimento do CHC são as infecções crônicas causadas pelo vírus da hepatite B (HBV) e da hepatite C (HCV), alcoolismo e fatores relacionados ao metabolismo e imunidade do paciente, os quais podem atuar isoladamente ou sinergicamente, acelerando, portanto, o dano hepático. Ademais, além do HBV e HCV, sabe-se que outros vírus hepatotrópicos desenvolvem infecções crônicas. Assim, o objetivo deste estudo foi analisar o viroma presente no soro de pacientes com e sem CHC, bem como investigar a ocorrência da infecção oculta pelo HBV e a diversidade genética do Torque teno vírus (TTV) em pacientes cronicamente infectados pelo HCV. Para a identificação do viroma circulante, amostras de soro de 37 pacientes foram selecionadas e agrupadas em 12 grupos distintos de acordo com a etiologia e o estágio da doença hepática. Os ácidos nucleicos extraídos foram submetidos a um processo de amplificação randômica, e as bibliotecas genômicas foram obtidas para posterior sequenciamento de nova geração (NGS) com abordagem metagenômica. Após a análise das sequências de NGS verificamos que nenhuma sequência viral foi recuperada a partir das bibliotecas genômicas. Além disso, um total de 151 pacientes com infecção crônica pelo HCV foi selecionado para a investigação de infecção oculta pelo HBV e de infecção pelo TTV A ocorrência de HBV oculto foi investigada por um ensaio de PCR em semi-nested tendo como alvo o gene S do HBV. A diversidade genética do TTV foi analisada por uma PCR multiplex que identifica simultaneamente todos os cinco genogrupos virais. Entre os 151 pacientes com infecção crônica pelo HCV incluídos neste estudo, cinco (3,3%) apresentaram infecção oculta pelo HBV. Todos os cinco pacientes foram diagnosticados com CHC (p=0,003). Os genótipos de HBV encontrados foram A1 (em três pacientes), e A2 e D3 (em um paciente, cada). A prevalência de TTV encontrada no grupo de estudo foi de 45%. A infecção pelo TTV foi significativamente mais frequente em pacientes com CHC do que nos pacientes sem o câncer (p=0,006). Todos os cinco genogrupos de TTV foram encontrados com frequências semelhantes em pacientes com e sem CHC. O genogrupo 3 foi o mais prevalente (45% e 28%), enquanto o genogrupo 2 foi o menos frequente (0 e 1%), em pacientes com e sem CHC, respectivamente. O resultado da análise metagenômica pode ter sido devido à ocorrência de uma possível contaminação bacteriana durante os experimentos. A presença de hepatite B oculta apenas nos pacientes com CHC sugere um fator associado ao desenvolvimento deste câncer em paciente cronicamente infectados pelo HCV. Nenhuma diferença significativa na prevalência dos genogrupos de TTV nos pacientes com e sem CHC foi encontrada. Ademais, a imunossupressão de pacientes com CHC pode ter sido o fator responsável pela maior frequência de coinfecções nestes pacientes.