Estudo das poliaminas em ciências forenses: avaliação de estratégias de pré-concentração para análise de poliaminas em sangue por eletroforese capilar

Abstract

As ciências forenses carecem de metodologias de determinação da hora da morte com maior índice de precisão. As poliaminas são aminas biogênicas alifáticas e estão envolvidas em processos putrescivos. Elas podem ser relacionadas com as ciências forenses como indicativo da hora da morte. A eletroforese capilar é uma técnica interessante pois permite a injeção direta de amostras complexas, sem necessidade de clean-up ou derivatização. Porém, nas análises por eletroforese capilar, técnicas de pré-concentração devem ser empregadas, visando melhorar os limites de detecção da técnica. O presente projeto teve como objetivo realizar uma revisão das técnicas de pré-concentração para análise de cadaverina, espermina, espermidina e putrescina em sangue total, assim como avaliar a viabilidade da análise, empregando estratégias de pré-concentração offline e online para a análise de poliaminas em sangue utilizando a eletroforese capilar. Amostras de soro foram obtidas do próprio pesquisador, enriquecidas com uma mistura das poliaminas e

submetidas à análise. Técnicas de pré-concentração offline (micro extração líquido- líquido dispersiva, DLLME) e online (stacking) foram empregadas. Contudo, os

resultados obtidos das amostras de soro não forneceram resultados positivos. Como as amostras de sangue coletadas em indivíduos no post-mortem são apenas de sangue total, as estratégias teriam de ser repetidas para estas amostras; porém, neste entremeio veio a pandemia de COVID-19 e os trabalhos de laboratório foram congelados. Após o término das medidas de isolamento físico, o equipamento de eletroforese capilar ficou indisponível devido a um problema técnico e as análises experimentais não puderam ser finalizadas.

Forensic sciences lack time-of-death experience methodologies with greater accuracy. Polyamines are aliphatic biogenic amines and are involved in putrescive processes. They can be related to forensic science as indicative of time of death. Capillary electrophoresis is an interesting technique because it allows the direct injection of a complex sample, without the need for clean-up or derivatization. However, in capillary electrophoresis analyses, pre-concentration techniques must be used, aiming to improve the detection limits of the technique. This project aimed to review the pre-concentration techniques for analysis of cadaverine, spermine, spermidine and putrescine in whole blood, as well as to evaluate the feasibility of the analysis, using offline and online pre-concentration strategies for the analysis of polyamines in blood using capillary electrophoresis. Serum samples were taken by the researcher himself, enriched with a mixture of polyamines and kept for analysis. Offline

(dispersive liquid-liquid microextraction - DLLME) and online (stacking) pre- concentration techniques were employed. However, the results obtained from serum

samples did not provide positive results. As the blood samples collected from individuals at post-mortem are whole blood only, the strategies must be repeated for these samples; however, in the meantime came the COVID-19 pandemic and laboratory work was frozen. After the end of the physical isolation measures, the capillary electrophoresis equipment became unavailable due to a technical problem and the experimental analyzes could not be finalized.