Mecanismos celulares envolvidos na modulação negativa de integrina α3 promovida por Paracoccidioides brasiliensis em células epiteliais pulmonares

Abstract

A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose humana sistêmica prevalente na América Latina, causada por fungos do gênero Paracoccidioides. Nos últimos anos, nosso grupo de pesquisa observou que a espécie P. brasiliensis interage com receptores da família das integrinas e promove em células epiteliais pulmonares, no período de 5 horas de infecção, um aumento da expressão da integrina α3. No entanto, após 24 horas de interação com P. brasiliensis, os níveis proteicos desta integrina foram reduzidos em aproximadamente 99% em comparação com células não infectadas. Nesta tese, demonstramos que P. brasiliensis induziu em células epiteliais pulmonares A549 a degradação de integrina α3 por via lisossomal. Além disso, em períodos intermediários de infecção, este fungo promoveu a ubiquitinação K63 em integrina α3, o que sinaliza para a endocitose do receptor e o direciona para os endossomos. Durante o curso da infecção fúngica, os níveis de integrina α3 também aumentaram nos endossomos tardios das células epiteliais e, por imunofluorescência indireta, observamos que a integrina α3 colocalizou-se com marcadores endossomais iniciais e tardios (Rab5 e LAMP-1, respectivamente) em diferentes períodos de infecção. Observamos nas células A549 infectadas 24 horas com P. brasiliensis que o inibidor da atividade lisossomal (bafilomicina A1) ou o silenciamento de uma das proteínas do Endosomal sorting complex required for transport, CHMP3, inibiu a redução dos níveis de integrina α3. Deste modo, estes resultados conjuntamente indicam que a infecção com P. brasiliensis em tempos tardios promove a redução dos níveis proteicos de integrina α3 por reduzir os níveis de mRNA e também por induzir a degradação lisossomal da integrina α3 nas células epiteliais pulmonares A549.