Perfil de citocinas induzidas pelo PPD e pelo extrato de Mycobacterium bovis em adolescentes atópicos e não atópicos de Salvador, Bahia

Abstract

Introdução: Têm-se debatido o papel de microrganismos na imunomodulação de doenças alérgicas atópicas cuja prevalência tem aumentado. A Micobactéria emerge, então, como um potencial agente imunomodulador. Objetivo: Identificar os perfis de citocinas induzidos pelo extrato de Mycobacterium bovis e pelo PPD e como elas são induzidas em adolescentes atópicos e não atópicos de Salvador, Bahia. Metodologia: O estudo utilizou amostra de conveniência de 55 indivíduos cujo sangue periférico coletado fora utilizado no cultivo de sangue total. As células foram estimuladas com 5μg do extrato de M. bovis ou 5μg do PPD. Utilizou-se o Multiplex para verificar o perfil de citocinas (IFNγ, IL-10, TNFα, IL-13, IL-5 e IL-17) induzido em 24h. A atopia foi determinada através da presença de IgE acima de 0,7 kU/mL para pelo menos um alérgeno (Blomia tropicalis, Dermatophagoides pteronissinus, Blatella germanica e Periplameta americana). A amostra foi dicotomizada em respondedor e não respondedor com base no limite mínimo de detecção do kit para cada citocina e o teste Exato de Fisher foi aplicado. Resultados: O estímulo com PPD e com extrato induziu mudanças significativas nas frequências de respondedores à IL-5, IL-13 e IL- 17, e à IL-5, IL-13, IL-17 e IFNγ, respectivamente. 97,7% dos indivíduos foram produtores de IL-10 em resposta ao extrato. Os compostos não induziram alterações significativas nas frequências de respondedores entre os grupos de atopia. Conclusão: As dosagens de citocinas serão finalizadas, incluindo-se a do sobrenadante de 120h, permitindo a aplicação de teste estatístico com maior poder para verificação dos efeitos dos compostos utilizados

Introduction: The role of microrganisms in immunomodulation of atopic allergic diseases whose prevalence has increased has been discussed. Mycobacteria emerges as a potential immunomodulatory agent. Objective: Identify the cytokine profile inducede by Mycobacterium bovis extract and PPD and how they are induced in adolescentes atopic and non-atopic from Salvador, Bahia. Methodology: This study used a convenience sample of 55 individuals. Pefipheral blood samples were used in the whole blood culture. The cells where stimulated with 5μg of M. bovis extract or 5μg of PPD. Multiplex was used to verify cytokine profile (IFNγ, IL-10, TNFα, IL-13, IL-5 e IL-17) induced in 24h. Atopy was determined by the presence of IgE above 0.7 kU / mL for at least one allergen (Blomia tropicalis, Dermatophagoides pteronissinus, Blatella germanica e Periplameta americana). The sample was dichotomized into responder and non-responder based on the minimum limit of kit detection for each cytokine and Fisher's Exact Test was applied. Results: The stimulation with PPD and with the extract induced significant changes in the frequency of responders to IL-5, IL- 13 and IL-17, and the frequency of responders to IL-5, IL-13, IL-17 and IFNγ, respectively. 97,7% of subjects were producers of IL-10 in response to the extract. The compounds did not induce significant changes in the frequency of responders between atopy groups. Conclusion: Cytokines dosages will be finalized including the 120h supernatant, allowing the application of statistical analysis with the largest verisimilitude as the power and verify the effects of these compounds used.