Tesis
Caracterização e expansão in vitro de células tronco epidermais derivadas da crista neural
Autor
Bressan, Raul Bardini
Institución
Resumen
TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Biologia. A implementação de tecnologias baseadas no uso de células tronco adultas
requer a identificação de fontes prontamente disponíveis bem como o
estabelecimento de metodologias de cultivo, expansão e diferenciação dessas
células. Este trabalho teve como objetivo principal a caracterização e a
expansão in vitro de células tronco epidermais da crista neural (EPI-NCSCs).
Tais células residem no folículo piloso adulto e são remanescentes da crista
neural - estrutura embrionária que origina o sistema nervoso periférico,
melanócitos da pele, e musculatura lisa, ossos e cartilagens da região cefálica.
Devido à acessibilidade e amplo potencial de diferenciação, as EPI-NCSCs são
consideradas candidatas promissoras para futuras aplicações em Medicina
Regenerativa e Bioengenharia Tecidual. Usando técnicas de cultivo de células
em condição aderente e lançando mão das metodologias de imunofluorescência,
RT-PCR, western blot e citometria de fluxo, demonstramos nesse trabalho que
as EPI-NCSCs isoladas de vibrissas de camundongos adultos são caracterizadas
pela expressão de genes característicos da CN (incluindo nestina, p75NTR,
Pax3, Slug, Snail, Sox10 e Twist) e podem ser rotineiramente cultivadas e
expandidas in vitro. Além disso, verificamos que a combinação dos fatores de
crescimento EGF e FGF2 no meio de cultivo estimula a proliferação e direciona
essas células a um estado de progenitor neuronal às expensas dos fenótipos glial
e de músculo liso – o que foi evidenciado, respectivamente, pelo aumento na
taxa de incorporação de BrdU e pela aquisição de morfologia semelhante à
neuronal aliada a expressão de proteínas neurais. Em última análise, esses
resultados evidenciam a possibilidade de obtenção de uma linhagem de células
neuronais a partir de um órgão de fácil acesso como a pele, bem como as
vantagens do uso dos fatores de crescimento EGF e FGF2 nesse processo. Tal
linhagem poderia futuramente servir de base para tratamento de lesões do
sistema nervoso, testes de drogas in vitro, e outras aplicações biotecnológicas.