Identification of Pythium insidiosum complex by matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry

Abstract

Objetivo: A pitiose é uma infecção de humanos e outros animais causada pelo patógeno fúngico Pythium insidiosum. Este patógeno causa infecção com risco de vida nos hospedeiros infectados. Cultura, histopatologia, sorologia e ferramentas moleculares são utilizadas para diagnosticar suas infecções. O sucesso do manejo da pitiose está diretamente ligado ao diagnóstico precoce. Assim, uma rápida identificação de culturas putativas desenvolvendo hifas escassamente septadas submersas é de extrema importância. No entanto, poucos laboratórios estão familiarizados com a identificação cultural desse patógeno único e seu diagnóstico diferencial com fungos filamentosos semelhantes. Metodologia: Avaliamos o uso da espectrometria de massas com dessorção a laser assistida por matriz-tempo de voo (MALDI-TOF) em 53 isolados de P. insidiosum coletados de casos de pitiose humana e animal nos EUA e no mundo. Para avaliar a especificidade da abordagem, 18 fungos filamentosos patogênicos e saprotróficos e micróbios semelhantes a fungos também foram testados. Resultados: Os espectros internos de MALDI-TOF identificaram corretamente os 53 isolados de P. insidiosum (intervalo de pontuação 1,93–2,51). A identificação baseada em MALDI-TOF em isolados de P. insidiosum mostrou variação nos espectros de proteína entre isolados geográficos diversos. Uma abordagem de espectrometria de massa foi capaz de discriminar P. insidiosum dos 18 fungos filamentosos e micróbios semelhantes a fungos neste estudo, incluindo quatro Pythium spp. e espécies fitopatogênicas de Phytopythium litorale. Conclusão: Os dados mostraram que MALDI-TOF pode ser usado para a identificação precisa e rápida da cultura de P. insidiosum no laboratório clínico.