Estudio histoquímico y ultraestructural de focos de criptas displásicas del intestino grueso inducidos con 1,2–dimetilhidrazina en ratas

Abstract

El objetivo de este estudio fue verificar cambios histoquímicosy ultraestructurales en los focos de criptas displásicas (FCD) inducidos por el carcinógeno1,2–dimetilhidrazina (DMH) en intestino grueso de ratas. Fueron utilizadas 30 ratasWistar machos, de 3 meses de edad, mantenidas con dieta balanceada (20 experimentales y10 controles). La DMH fue administrada a los animales experimentales por vía subcutáneadurante 16 semanas, a dosis de 20 mg/kg de peso corporal. Luego de la última inoculaciónse sacrificaron todos los animales de ambos grupos. En el intestino grueso se localizaronlos FCD, en los cuales se estudiaron los cambios histológicos e histoquímicos del epiteliointestinal a partir de muestras seccionadas en 5μm, coloreadas con hematoxilina y eosina,PAS y azul alcian a pH 2,5; también fueron examinados mediante microscopía electrónicade barrido. Histoquímicamente los FCD se caracterizaron por disminución o ausencia de lacoloración de mucosustancias neutras y ácidas, reaccionando negativamente al PAS y al azulalcian. Desde el punto de vista ultraestructural se registraron aumentos del tamaño de lascriptas (hiperplasia y crecimiento desorganizado de las células glandulares) y cambios enla superficie, caracterizados por una leve distorsión de las bocas de aberturas de las criptas,aumento del grosor de sus paredes y disminución del número y tamaño de las microvellosidades(menor grado de maduración). Las lesiones halladas indican que la superficie mucosadel intestino grueso de ratas tratadas con DMH desarrolla cambios morfológicos durante lacarcinogénesis, evidenciables antes de la aparición del tumor visible macroscópicamente.

The main objective of this study was to determine the histochemical and ultrastructural changes of the large intestinal dysplastic crypt foci induced by 1,2–dimethylhydrazine, in rats. Wistar male rats, 3 months–old, were fed ad–libitum with a nutritionally adequate diet and demineralized drinking water. Large intestinal dysplastic crypt foci (DCF) were induced by 1,2–dimethylhydrazine (DMH), given subcutaneously as 16 weekly doses at 20 mg/kg body weight. After the last carcinogen injection, all animals were sacrificed and examined for intestinal DCF. Histological and histochemical changes of intestinal epithelium and mucins were observed at the end of the experience in specimens sectioned at 5 µm, stained with hematoxylin and eosin, PAS and alcian blue pH 2,5. Scanning electron microscopy of dysplastic crypt foci were examined. The findings indicate that the surface of the intestinal mucosa of DCF–treated rats develops abnormalities during carcinogenesis, before the appearance of a macroscopically visible tumour.