Evaluación del potencial antiviral del Bortezomib contra el virus Chikungunya

Abstract

El sistema ubiquitina-proteasoma (Ub-P) es responsable de la degradación específica de proteínas. Ha sido ampliamente descrito que la proteólisis dependiente del sistema Ub-P es fundamental para la replicación de virus patogénicos humanos y que el Bortezomib es un inhibidor del proteasoma aprobado por la FDA para el tratamiento de mieloma múltiple, este trabajo evaluó su efecto sobre la replicación del virus chikungunya (CHIKV) en células HEK293T. Se determinó la concentración y el tiempo de exposición al Bortezomib para inhibir el proteasoma y no afectar la viabilidad celular. Las células se trataron con concentraciones desde 50 hasta 2500nM por periodos de 2h hasta 24h y se evaluó la viabilidad celular por el ensayo de resazurina. Para verificar la inhibición del proteasoma se realizó un ensayo de actividad proteolítica, a partir de extractos proteicos de células tratadas y no tratadas con Bortezomib y un substrato fluorogénico (SLLVY-AMC) para medir la actividad similar a quimotripsina del proteasoma. Luego, se llevó a cabo la infección con CHIKV a moi 1 en presencia del inhibidor y 24h después se recolectaron los sobrenadantes para cuantificar las partículas virales liberadas por RT-qPCR. El tratamiento por 4h con 1,0 μM de Bortezomib fue suficiente para reducir la actividad del proteasoma en un 30% sin afectar la viabilidad celular. Bajo estas condiciones, el inhibidor ocasionó una disminución de 2 unidades logarítmicas en el título viral. El Bortezomib podría ejercer un efecto antiviral sobre el virus chikungunya, aunque es necesario comprobar este efecto utilizando otras líneas celulares humanas.