dc.contributor | Gutiérrez Román, Ana Isabel Flor | |
dc.contributor | Nolasco Cárdenas, Oscar Patricio | |
dc.creator | Miranda Lucero, Melissa | |
dc.date.accessioned | 2019-12-26T21:03:50Z | |
dc.date.accessioned | 2023-06-02T14:48:11Z | |
dc.date.available | 2019-12-26T21:03:50Z | |
dc.date.available | 2023-06-02T14:48:11Z | |
dc.date.created | 2019-12-26T21:03:50Z | |
dc.date.issued | 2019-12-03 | |
dc.identifier | https://hdl.handle.net/20.500.13084/3866 | |
dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/6573326 | |
dc.description.abstract | Por muchas décadas el diagnóstico de la malaria, enfermedad causada por el protozoario Plasmodium spp., ha estado y sigue basado en el análisis microscópico de la gota gruesa. En el contexto del plan de fase hacia la eliminación de la Malaria, es importante detectar y tratar la malaria asintomática y subpatente para lo cual se requiere implementar nuevas herramientas diagnosticas como los sistemas de técnica molecular que permitan una alta sensibilidad y así eliminar los reservorios de la enfermedad. Con este fin, se desarrolló un sistema de amplificación PET (Photo-Induced Electron Transfer) PCR para comparar con otras plataformas molecular y determinar su sensibilidad y especificidad analítica. Se diseñaron cebadores específicos usando como genes de referencia PFr364 y Pvr47 para detectar Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax, respectivamente. Se estandarizó las condiciones de amplificación para determinar la temperatura de alineamiento y la concentración de cebadores a usar. Así mismo, se evaluaron diferentes parámetros como el rango dinámico de amplificación, el límite de cuantificación, el límite de detección, la especificidad analítica, la repetitividad y reproducibilidad para métodos cuantitativos, tanto en sistema singleplex como en multiplex. Finalmente, se evaluó un grupo de muestras, previamente analizados por gota gruesa y qPCR SybrGreen, comparando los resultados obtenidos. En comparación con el sistema qPCR en SybrGreen, el sistema PET-multiplex permite la detección de P. falciparum y P. vivax indistintamente, sin el uso de herramientas adicionales como temperatura de melting, permitiendo la identificación de infecciones mixtas. Así el sistema PET permite la detección de infecciones menores a 1 parásito/ μl, encontrándose en el rango de infecciones submicroscópicas. | |
dc.language | spa | |
dc.publisher | Universidad Nacional Federico Villarreal | |
dc.publisher | PE | |
dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/us/ | |
dc.rights | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | |
dc.rights | Attribution-ShareAlike 3.0 United States | |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
dc.source | Universidad Nacional Federico Villarreal | |
dc.source | Repositorio institucional - UNFV | |
dc.subject | Plasmodium | |
dc.subject | Malaria | |
dc.subject | PET-PCR | |
dc.subject | diagnóstico molecular | |
dc.title | Diseño de un sistema pet-pcr in house para el diagnóstico molecular de plasmodium falciparum y plamodium vivax | |
dc.type | info:eu-repo/semantics/bachelorThesis | |