Técnica de crossmatch por citometría de flujo utilizando human BD Fc block como agente bloqueante

Abstract

El ensayo de crossmatch por citometría de flujo (XMCF) proporciona un medio altamente sensible para detectar la presencia de anticuerpos contra el donante de órganos sólidos. El principal inconveniente que se presenta en esta técnica es la unión de las inmunoglobulinas de manera inespecífica a los receptores Fc en la superficie de los linfocitos B. Para evitar esto se realiza un tratamiento con pronasa. Dicho tratamiento puede afectar a otras moléculas de la superficie celular, alterando la expresión de epítopos anómalos e influyendo en la especificidad del ensayo. En el presente trabajo se plantea el uso de fragmentos Fc recombinantes para bloquear los receptores Fc, inhibiendo la unión inespecífica de anticuerpos humanos. Se utilizó la técnica de XMCF protocolo Halifax, comparando resultados al utilizar pronasa vs la variante propuesta en el trabajo, Human BD Fc Block. Del total de pruebas realizadas al momento de concluir el estudio y de acuerdo a los resultados obtenidos, se encontró diferencia estadísticamente significativa (*p<0,05) para los Linfocitos T, en tanto que dicha diferencia no fue significativa al realizar la comparación de las mismas sobre los Linfocitos B. Según la bibliografía consultada y de acuerdo a los resultados obtenidos en el estudio, podemos predecir el daño que provoca en los linfocitos T el uso de la pronasa como método de eliminación de los receptores Fc de los linfocitos B. Esto podría sugerir que el tratamiento con pronasa es propenso a dar reacciones falsas positivas en las pruebas de XMCF con linfocitos T.