Análises morfoquantitativas de avaliação da junção neuromuscular

Abstract

A Junção Neuromuscular (JNM) é a região entre o terminal axonal e a fibra muscular, gerando respostas mecânicas, como a contração muscular. Constituída pela região pré-sináptica, fenda sináptica e a região pós-sináptica - regiões onde ocorrem a transdução do sinal elétrico em químico. A JNM pode sofrer alterações decorrentes de diferentes influências, como a obesidade (comorbidade causada pelo excesso de tecido adiposo), patologias - entre elas a distrofia muscular -, exercício físico e o envelhecimento, sendo de extrema relevância a avaliação destas adaptações da JNM perante estes estímulos internos e externos. Desse modo, o objetivo do estudo foi avaliar as formas de mensurações morfoquantitativas da JNM e de suas regiões présináptica e pós-sinápticas. Desta forma o presente estudo investiga qual a técnica microscópica e metodologias de mensuração apresentam maior eficiência para elucidação das adaptações da JNM e quais suas limitações. Este estudo realizou uma análise prática de mensurações da região pós-sináptica da JNM juntamente com uma análise de relato/discursiva das mensurações. Com base para a avaliação foram utilizados artigos científicos e estudos em plataformas de base de dados como: PubMed, Scopus e Google Scholar, por meio das técnicas de mensuração. Foi utilizado o acervo de imagens das fendas pós-sinápticas de ratos Wistar, fornecidas pelo Laboratório de Morfologia e Atividade Física (LAMAF), com aprovação pela Comissão de Ética de Uso Animal (CEUA). As técnicas de mensuração foram realizadas por meio das metodologias semi-automatizadas e manuais, medindo variáveis como perímetro total e corado, área total e corada, dispersão, número de clusters, diâmetro, quantidade cluster/area, index de fragmentação, quantidade JNM e densidade integrada. Apesar de ambos os métodos serem de suma importância, a metodologia semi-automatizada se apresentou como mais coerente, pelo fato de padronizar as mensurações até a geração das medidas. Além disso, o método acompanha um material de apoio, que instrui a forma de mensurar, e uma tabela que auxilia na compreensão dos resultados.

The Neuromuscular Junction (NMJ) is the region between the axon terminal and the muscle fiber, generating mechanical responses, such as muscle contraction. Consisting of the presynaptic region, synaptic cleft and the postsynaptic region - regions where an electrical signal is transduced into chemical. The disease can undergo changes after changes in stimuli, such as NMJ muscle disease - due to the exercise of excess tissue to pregnancy after obesity, - among the problems resulting from the evaluation of different stimuli, being from NMJ aging, excess exercises of weight, calculated to them, being the evolution of the dystrophy of the NMJ. internal and external. Thus, the objective of the study was to evaluate the forms of morphoquantitative measurements of the NMJ and postsynaptic region. From these techniques and larger measurement investigations were obtained to elucidate the form of which the NMJ and its major techniques. This study of a practical analysis of postanalysis measurements from NMJ experiments in analysis of a reporting analysis of measurements. As a basis for evaluation, articles and studies were used in scientific database platforms such as: PubMed, Scopus and Google Scholar, through measurement techniques. It was the image collection of the postsynaptic clefts used by Wistar, provided by the Morphology and Physical Activity Laboratory (LAMAF), with approval by the Animal Use Ethics Committee (CEUA). As measurement techniques were performed through semi-automated and manual methodologies, measuring as parameters such as total and stained perimeters, total area, dispersion, number of clusters, quantity, cluster/area, fragmentation index, NMJ quantity and integrated density. Although both methods are of paramount importance, the semi-automated methodology is presented as more coherent, as it standardizes the measurements until the measurements are generated. In addition, the method comes with support material, which instructs the measurement method, and a table that helps in understanding the results.