Diagnóstico serológico de Paramixovirus ofídico en serpientes en cautiverio en Costa Rica

Abstract

El objetivo de la presente investigación fue demostrar la presencia de anticuerpos contra el paramixovirus ofídico (PMVO) en el suero de 150 vipéridos, en cautiverio, ubicados en nueve establecimientos en Costa Rica, mediante la prueba de inhibición de la hemoaglutinación (IHA) utilizando, para tal fin, las cepas Bush Viper (BV) y Neotropical (NT) como antígeno. Ambas cepas fueron replicadas en células Vero y en huevos embrionados de pollo a temperatura de incubación de 28°C. Dos grupos de aves, tres aves en cada grupo, fueron inmunizadas con cada cepa con el fin de preparar antisueros específicos para ser utilizados como control positivo en la prueba de IHA. La interpretación de los resultados positivos se realizó de la siguiente forma: leves (1:20 a 1:80), moderados (1:160) y fuertes (>1:160). La seroprevalencia de anticuerpos específicos a PMVO fue de 26% (n=39) para la cepa BV y 28,6% (n=43) para la cepa NT. Además, se implementó la amplificación en cadena de la polimerasa (PCR) como prueba diagnóstica del PMVO complementaria a la IHA. Los datos de nuestra investigación demuestran por vez primera en Costa Rica evidencia serológica de la presencia de infecciones con dos cepas de PMVO en vipéridos mantenidos en cautiverio. Adicionalmente, se logró diagnosticar un caso clínico como positivo al virus por medio de PCR.

The objective of the present investigation was to demonstrate antibodies against the ophidian paramyxovirus (OPMV) in serum samples from 150 vipers belonging to nine captive collections in Costa Rica. A hemaglutination inhibition (HAI) assay was used to evidence antibodies against OPMV strains denominated Bush viper (BV) and Neotropical (NT). Each strain was replicated in Vero cells and in embryonated chicken eggs using an incubation temperature of 28°C. Two groups of three birds each were immunized with each strain respectively, in order to obtain specific antiserum to use as positive control in the HI test. The positive results were grouped as follows: low (1:20 to 1:80), moderate (1:160), and strong (>1:160). The seroprevalence toward specific OPMV antibodies were: 26% (n=39) for the BV strain and 28,6% (n=43) for the NT strain. Also, a polymerase chain reaction (PCR) technique was implemented as a complementary diagnostic test for the OPMV. Our data prove, for very first time in Costa Rica, serological evidence of infections with two strains of PMVO in vipers in captivity. Additionally, using PCR assay, we were able to relate a clinical affected case with OPMV disease