| dc.description.abstract | Este trabajo de tesis tiene como objetivo contribuir al conocimiento de las bases
neurobiológicas de los efectos de Gr a nivel del sistema nervioso central, particularmente en
hipocampo, investigando el/los posibles mecanismos implicados en la modulación de la
retención de la memoria. Estudios previos en nuestro laboratorio, han demostrado que Gr
incrementa la retención de la memoria y la ingesta de alimentos cuando se administra
localmente en esta estructura. Además, los efectos de Gr sobre la memoria se correlacionan
con parámetros tales como el incremento en la actividad de la enzima óxido nítrico sintasa
(NOS), con la disponibilidad del neurotransmisor serotonina (5-HT) y con la disminución
del umbral para generar potenciación a largo plazo (LTP).
Los experimentos de esta tesis incluyen el estudio de los posibles mediadores de la
cadena bioquímica de la memoria modulados por Gr, como así también, la participación de
neurotransmisores en los efectos del péptido, utilizando paradigmas conductuales,
determinaciones bioquímicas y electrofisiológicas, bloqueo farmacológico de receptores y
técnicas inmunohistoquímicas, a fin de definir el papel funcional de Gr sobre la memoria.
Más específicamente, estudiamos si los efectos de la administración intrahipocampal de Gr
sobre la memoria, dependen de la activación de su receptor específico GHS-R1a, de
modificaciones en la liberación de glutamato y/o de la expresión de sus receptores, con
particular atención en la subunidad NR2B del receptor NMDA. Analizamos también, si Gr
modifica la liberación del neurotransmisor 5-HT y si ello se correlaciona con el incremento
en la retención de la memoria.
Los resultados mostraron que Gr facilita la consolidación de la memoria evaluada
en una prueba de evitación inhibitoria (SDT), ejerciendo sus efectos en una ventana
temporal determinada, es decir, sólo cuando es infundida inmediatamente y no a los 15 o 60
min después del entrenamiento. Se demostró también, que los efectos de Gr sobre el
comportamiento y los parámetros electrofisiológicos desaparecen cuando se infunde en
hipocampo un antagonista selectivo del receptor de Gr, D-Lys3-GHRP-6, previo a la
infusión del péptido, indicando que los efectos observados son mediados por la activación
directa del receptor de Gr (GHS-R1a) en esta estructura. En lo que a liberación de glutamato se refiere, la administración de Gr incrementa la liberación evocada de
glutamato a partir de sinaptosomas hipocampales, de una manera dependiente de la dosis.
En cuanto al efecto de la administración intrahipocampal de Gr sobre la expresión de la
subunidad NR2B del RNMDA, el péptido incrementa el número de células
inmunorreactivas-NR2B en las áreas hipocampales CA1 y DG. Con el fin de agregar
información funcional sobre la participación de la subunidad NR2B del RNMDA en los
efectos de Gr, se estudiaron los efectos comportamentales y electrofisiológicos del péptido
en animales previamente infundidos con el antagonista específico de la subunidad NR2B,
Ro 25-6981. Cuando Gr se infundió en estos animales, que presentan un deterioro en la
retención de la memoria, los valores obtenidos para el tiempo de latencia alcanzan valores
similares a los del grupo control, sugiriendo que Gr es capaz de revertir el efecto deletéreo
del antagonista sobre la retención de la memoria. Con respecto a los parámetros
electrofisiológicos, cuando Gr se infundió en animales pretratados con Ro 25-6981, en los
cuales no puede generarse LTP, los valores de umbral para inducir este fenómeno
aumentaron en comparación con el grupo Gr, pero fueron significativamente más bajos
que los del grupo salina.
Resultados previos en el laboratorio, sugirieron que los efectos de Gr dependerían de
la disponibilidad de 5-HT. En consecuencia valoramos la liberación de 5-HT a partir de
rebanadas de hipocampo, demostrándose que Gr inhibe la liberación de [3H]5-HT. Esta
disminución en la liberación de 5-HT se correlaciona con un mayor tiempo de latencia en el
SDT (indicativo de retención de la memoria).
En conclusión, estos resultados refuerzan la hipótesis de que Gr podría modular los
primeros eventos de la consolidación de la memoria en hipocampo, probablemente
mediante el aumento de los niveles de [Ca+2]i inducido por la activación de sus receptores
GHS-R1a, el incremento en la liberación de glutamato, la activación de los RNMDA con un
aumento de la expresión de la subunidad NR2B, estimulando de esta manera diferentes vías
moleculares que contribuyen a la facilitación en la retención de la memoria y a la inducción
de LTP. | |
