Aplicação do microarray de cDNA para identificação de genes inflamatórios diferencialmente expressos na polipose nasal

Abstract

Objetivo: Identificar genes inflamatorios diferencialmente expressos na polipose nasal nao alergica, pela tecnica do microarray de cDNA. Metodos: Utilizou-se a tecnica do microarray de cDNA para identificar diferencas de expressao para 96 genes inflamatorios entre o polipo e a mucosa nasal adjacente em 21 pacientes portadores de polipose nasal nao alergica. O RNA total foi isolado de cada amostra separadamente e agrupado em quantidades iguais em dois pools (polipo e mucosa nasal adjacente). Preparou-se a sonda de cDNA com 20 gg do RNA total atraves da reacao de transcricao reversa. Realizou-se a hibridacao do CDNA marcado radioativamente com as membranas para cada grupo separadamente. Utilizou-se o RTPCR para a validacao do cDNA apos normalizacao, para os seguintes genes: TNF,IL5,IL9,FIGF e TGF~-1. Resultados: Dos 96 genes estudados, 37 mostraram diferencas de expressao entre o polipo e mucosa adjacente. A expressao dos 37 genes foi maior na mucosa nasal adjacente do que no polipo. O RT-PCR confirmou os resultados do cDNA e mostrou que existe um desequilibrio entre a IL5 e TGF-1 entre o polipo e a mucosa nasal adjacente. Conclusoes: O microarray de cDNA consiste em um metodo eficaz para a identificacao de genes com diferencas de expressao. Existe um desequilibrio da IL5 e do TGF-1 entre o polipo e mucosa nasal adjacente ao polipo. A maior expressao do TGF-1 na mucosa nasal adjacente ao polipo associada a baixa expressao desta citocina no polipo reflete o seu papel protetor no desenvolvimento do polipo