Avaliação dos efeitos da manose em células de melanoma humano

Abstract

A elevada demanda energética imposta pelo processo oncogênico tem importantes consequências no metabolismo de células cancerosas, bem como tem impacto expressivo nos métodos de diagnóstico e terapias associadas ao tratamento de neoplasias. A manose é um epímero da glicose e, portanto, é absorvida pelos mesmos transportadores que a glicose. Trabalhos recentes utilizando linhagens celulares tumorais demonstraram que este epímero da glicose se acumula nas células como manose-6-fosfato (M6P), devido à baixa expressão da enzima fosfomanose isomerase (PMI), que converte M6P em frutose-6-fosfato (F6P), um intermediário da via glicolítica. Esta característica tem impacto significativo no metabolismo da glicose pela via glicolítica, ciclo tricarboxílico e via das pentoses fosfato. Neste trabalho, focamos no estudo do efeito da manose sobre diversos processos celulares, como o crescimentocelular, a autofagia, a glicosilação de proteínas, o ciclo celular e morte celular programada. Para isso foram realizados ensaios de curva de crescimento das culturas, separação de proteínas do secretoma em resina de Concanavalina-A e posterior SDS-PAGE para identificação de proteínas glicosiladas, western blotting da proteína LC3-II, identificação de Organelas Vesiculares Ácidas (AVO’s) por citometria de fluxo para o estudo de autofagia e análise do ciclo celular (proporção G0G1/G2M) e morte celular programada (% SubG1) por citometria de fluxo. Observou-se que as linhagens celulares tratadas com manose apresentaram redução significativa no crescimento celular. Também foi observado um acréscimo na produção de AVO’s e células em morte celular programada (SubG1) nos grupos tratados exclusivamente com manose. Entretanto, não foi capaz de se observar aumento de proteínas glicosiladas secretadas, diferença significativa de proteína LC3-II no lisado e nem alterações significativas no ciclo celular das células que foram tratadas com manose.