Caracterização da especificidade primária da hsp65r de Mycobacterium leprae e estudo da possível relação desta atividade catalítica com o seu poder imunogênico

Abstract

Neste trabalho, o possivel envolvimento da atividade proteolitica da hsp65 chaperonina 2 (cpn2) de M. leprae na apresentacao de epitopos MHC classe 1 esta sendo sugerido. O estudo da especificidade primaria da hsp65 recombinante cpn 2 de Mycobacterium leprae frente a substratos peptidicos fluorescentes, mostrou especificidade por residuos basicos em posicao P,, em adicao a atividade tripsina-simile, fato que ja foi relatado pelo nosso grupo (Portaro e cols, 2002). Observou-se hidrolise de substratos de tamanho restrito, entre 7 e 13 residuos de aminoacidos e, em menor proporcao, clivagem da ligacao peptidica no substrato analogo ao receptor de trombina PARI envolvendo aminoacido hidrofobico (Phe) em PI. Durante o estudo da caracterizacao de sua atividade proteolitica, verificamos, pela primeira vez, que apresenta atividade ATPasica (Km 95 p.M e kcat = 2,6 min -1) e que sua atividade enzimatica e influenciada por nucleotideos e cations monovalentes e bivalentes. Esse trabalho, ainda, corelaciona as sequencias de aminoacidos, focalizando epitopos MHC classe 1, e as atividades adjuvantes e cataliticas de hsps65. As possiveis implicacoes fisiopatologicas da atividade proteolitica da hsp65 de M. leprae estao agora sob ampla investigacao em nosso laboratorio