Avaliação da heterogeneidade nos éxons dos genes BRAF, MAP2K1 e MAP2K2 em melanomas primários e metastáticos

Abstract

The incidence of melanoma has been increasing in recent decades. The superficial spreading, the most common melanoma subtype, is related to intermittent exposure to ultraviolet radiation. Acral lentiginous melanoma affects places not exposed to solar radiation, more common in the Asian and Afro-descendant population. The MAP kinase pathway is one of the main active pathways in melanomas, responsible for mediating cellular signals of cell growth, proliferation and differentiation. BRAF mutations can be present from early stages of development, stimulate proliferation and survival, appear in 50 to 70% of melanomas. The BRAF-targeted therapy increased the survival of patients with metastatic melanoma, but this response may be short, due to several resistance mechanisms, such as the presence of other subclones with mutations in the MAP2K1 and MAP2K2 genes. Genetic heterogeneity results in this genotypic variation and causes the same therapeutic approach to result in different efficacy responses, contributing to therapeutic failure. Objective: Evaluation of mutations and heterogeneity in exons of the BRAF, MAP2K1 and MAP2K2 genes in primary and metastatic melanomas. Patients and Method: Twenty-seven samples of primary and metastatic superficial spreading and acral lentiginous melanoma were analyzed for BRAF, MAP2K1 and MAP2K2 mutations using the new generation sequencing technique. Results: In lentiginous acral melanoma, the mutation rate found was 50% in the BRAF and MAP2K1 gene and 28.6% in MAP2K2. In the superficial spreading, BRAF was mutated in 76.9%, MAP2K1 in 30.8% and MAP2K2 in 23.2% of the cases. All samples were formed by distinct tumor subclones in the same lesion. Intertumoral heterogeneity was present between primary and metastatic lesions of lentiginous acral melanoma in BRAF, MAP2K1 and MAP2K2, the cases of superficial spreading were heterogeneous for BRAF and MAP2K1. Conclusion: Samples of acral lentiginous and superficial spreading melanoma showed heterogeneous mutation profile (intra- and intertumoral) in the BRAF, MAP2K1 and MAP2K2 genes.

Introdução: A incidência do melanoma tem aumentado nas últimas décadas. O extensivo superficial, subtipo mais comum, está relacionado com exposição intermitente à radiação ultravioleta. O melanoma acral lentiginoso acomete locais não expostos à radiação solar, mais usual na população asiática e afrodescendente. A via MAP-quinase é uma das principais vias ativas no melanoma, responsável por mediar sinais celulares de crescimento, proliferação e diferenciação celular. Mutações em BRAF podem estar presentes desde estadios iniciais de desenvolvimento, estimulam a proliferação e sobrevivência, aparecem em 50 a 70% dos melanomas. A terapia alvo neste gene aumentou a sobrevida de pacientes com melanoma metastático, porém essa resposta pode ser de curta duração, devido a diversos mecanismos de resistência, como a presença de outros subclones com mutações nos genes MAP2K1 e MAP2K2. A heterogeneidade genética resulta nesta variação genotípica e faz com que a mesma abordagem terapêutica possa resultar em diferentes respostas de eficácia, colaborando para a falha terapêutica. Objetivo: Avaliar as mutações e heterogeneidade nos éxons dos genes BRAF, MAP2K1 e MAP2K2 em melanomas primários e metastáticos. Pacientes e Método: Vinte e sete amostras de melanoma extensivo superficial e acral lentiginoso primários e metastáticos foram analisadas quanto a mutações em BRAF, MAP2K1 e MAP2K2 pela técnica de sequenciamento de nova geração. Resultados: No melanoma acral lentiginoso, a taxa mutacional encontrada foi de 50% nos genes BRAF e MAP2K1 e de 28,6% em MAP2K2. No extensivo superficial, mutações em BRAF foram encontradas em 76,9%, MAP2K1 em 30,8% e MAP2K2 em 23,2% dos casos. Todas amostras eram formadas por subclones tumorais distintos na mesma lesão. Heterogeneidade intertumoral foi observada entre lesões primárias e metastáticas de melanoma acral lentiginoso quanto a mutações em BRAF, MAP2K1 e MAP2K2 e nos casos de extensivo superficial quanto a mutações em BRAF e MAP2K1. Conclusão: As amostras de melanoma acral lentiginoso e extensivo superficial analisadas neste estudo apresentaram perfil mutacional heterogêneo (intra- e intertumoral) nos genes BRAF, MAP2K1 e MAP2K2.