Sinalização celular e sua modificação produzida pelo envelhecimento nas células da medula óssea de camundongos estimuladas por ATP

Abstract

O sistema linfo-hematopoietico renova-se, diferencia-se e responde diversos estimulos durante o tempo de vida do organismo. As celulas deste sistema respondem ao ATP devido a presenca de receptores P2. Procuramos caracterizar as alteracoes funcionais das celulas da medula ossea de camundongos da linhagem C57BUL/10 com o passar da idade utilizando como agonista o ATP. Nos animais velhos, constatou-se que a membrana celular permanece integra nao aumentando a sua permeabilidade para o brometo de etideo, porem e bicamada lipidica desestrutura-se, reduzindo a possibilidade de formacao de canais de gramicidina Na+-seletivos nas celulas da medula ossea deste: camundongos velhos. Tambem foi observado incremento das proteinas totais e aumento da [Ca 2+]i basal com a idade. No entanto verificou-se a reducao de potencia e aumento da eficacia da resposta ao ATP com a idade. Isto talvez se deva as alteracoes dos mecanismos de controle do Ca2+ intracelular e/ou alteracoes dos receptores P2. Altas concentracoes de ATP levam ao vazamento do fluoroforo de Ca2+ fura-2 com queda da razao 340/380 nm. Tais fatos sugerem a ativacao do P2X7. A Ativacao do P2X7 por altas concentracoes de ATP (4 mM) promoveu apoptose no: granulocitos, mas a apoptose se viu reduzida com a idade. Como a medula ossea e um tecido heterogeneo passou-se a estudar as populacoes celulares de granulocitos e eritroblastos. Nestas celulas foi comprovada a presenca de receptores P2X7 pelo uso do seu inibidor OxATP, que bloqueou a queda da razao 340/380 nm. Nos granulocitos a ordem de potencia nas curvas cumulativa concentracao-resposta foi a seguinte: ATP > AMP > ATP > ATPS > UTP = ADP. E nos eritroblastos a ordem de potencia foi: UTP > ADP > ATP = ATPS= ATP = AMP. Nos granulocitos, verificou-se a importancia da participacao da ecto-ATPase na resposta ao ATP (no aumento da [Ca2+]i) utilizando-se seu inibidos ARL67156. Nos eritroblastos este inibidor teve pouco efeitoa(au)