Quantificação do número de plaquetas a partir de diferentes métodos de centrifugação em ratos da linhagem shr

Abstract

Introduction: Platelet-rich plasma has become an important clinical tool for tissue regeneration in wound healing. Purpose: We aimed to quantify the blood platelet concentration of SHR rats, using different centrifugation protocols and to determine the most effective method of obtaining platelets. Methods: From 40 male SHR rats, blood (3 mL) was taken by cardiac puncture and placed in a vacutainer collection tube containing 3.2% sodium citrate. The samples were divided into 3 groups according to the centrifugation protocol: control group (whole blood analyzed without centrifugation), single-centrifugation group (whole blood subjected to a single centrifugation at 200 ×g or 400 ×g), and doublecentrifugation group (whole blood subjected to centrifugation followed by total plasma subjected to another centrifugation at different speeds: 200 ×g + 200 ×g, 200 ×g + 400 ×g, 200 ×g + 800 ×g, 400 ×g + 400 ×g, and 400 ×g + 800 ×g). After centrifugation, total plasma was collected and platelets in the bottom third of the samples were counted. Results: We obtained higher platelet enrichment in the samples that underwent 2 centrifugations, with the highest enrichment with 400 ×g + 400 ×g. Conclusion: We obtained a high platelet concentration using simple and feasible technique using centrifugation of whole blood and commonplace materials.

Introdução: O plasma rico em plaquetas (PRP) é a concentração autóloga de plaquetas em pequeno volume de plasma, obtido por centrifugação do sangue total. A obtenção do concentrado de plaquetas é relativamente simples e de baixo custo, proporcionando tratamentos autólogos com potencial para estimular o processo biológico natural da cicatrização e auxiliar na regeneração de diversos tecidos. Objetivo: Quantificar a concentração de plaquetas do sangue de ratos SHR, por meio de diferentes métodos de centrifugação e avaliar qual destes é mais eficaz de obtenção de plaquetas. Materiais e Métodos: Utilizamos 40 ratos machos da linhagem SHR. Os animais foram divididos em três grupos: Controle (GCT) ? sangue total sem centrifugação; Única Centrifugação (GUC) ? sangue total submetido a uma única centrifugação: 200g e 400g; Dupla Centrifugação (GDC) ? sangue total submetido a uma centrifugação, seguido de coleta do plasma total submetidos a outra centrifugação: 200g + 200g; 200g + 400g; 200g + 800g; 400g + 400g; 400g + 800g. O sangue foi acondicionado em tubo de coleta vacutainer contendo citrato de sódio 3,2%. O sangue dos animais do grupo controle não foram submetidos à centrifugação e foram analisados. Após a centrifugação do sangue dos animais, o plasma total foi coletado e realizada a contagem de plaquetas do terço inferior da amostra. Resultados: Obtivemos maior enriquecimento de plaquetas no subgrupo de duas centrifugações (400g por 10 minutos + 400g por 10 minutos), onde ocorreu uma concentração média de plaquetas 11,30 vezes superior em relação ao grupo controle. Conclusão: Foi possível obter uma alta concentração plaquetária, utilizando técnica simples e viável, através de centrifugação do sangue total e utilização de materiais de uso corriqueiro; e método mais eficaz de obtenção de concentrado de plaquetas ocorreu nas amostras submetidas a duas centrifugações.