Efeito adjuvante da Propionibacterium acnes e de seu componente polissacarídico purificado sobre a resposta imune em camundongos submetidos à imunização com vacina DNA de Trypanosoma cruzi

Abstract

Propionibacterium acnes (P. acnes) morta, quando administrada sob a forma de suspensão em animais experimentais e no homem, modula diversas funções da resposta imune tais como: aumento da atividade fagocítica e tumoricida de macrófagos, efeito adjuvante sobre a resposta humoral e aumento da resistência a infecções, incluindo infecção por Trypanosoma cruzi (T cruzi). Efeitos biológicos similares são observados quando os animais são tratados com polissacarídeo solúvel extraído da superfície bacteriana, caracterizado e purificado em nosso laboratório. A P. acnes induz a síntese de citocinas pró-inflamatórias, principalmente IL-12 e IL-18, que tem permitido seu uso em estudos experimentais como indutora de resposta Th1. Em um modelo de asma alérgica murina, verificamos que a P. acnes ou seu componente polissacarídico foram capazes de abolir a resposta Th2 induzida pela ovoalbumina mudando-a para padrão Th1. Esses achados nos levaram a investigar no presente trabalho se a bactéria e seu componente eram capazes de aumentar em camundongos a eficácia da vacina DNA para T cruzi. Nós empregamos um plasmídeo, p154/13, contendo o gene que codifica o domínio catalítico da trans-sialidase do T. cruzi, o qual induz em camundongos BALB/c, anticorpos para a trans-sialidase, células TCD4+ e TCD8+ específicas, promove a ativação de macrófagos e lise de células infectadas por formas amastigotas intracelulares mediada por IFN-, conferindo imunidade protetora contra infecção por T cruzi. Camundongos BALB/c foram imunizados com P. acnes ou seu componente polissacarídico solúvel e com o plasmídeo p154/13 em dois protocolos diferentes: (1) os camundongos receberam uma dose semanal de P. acnes ou polissacarídeo solúvel durante 4 semanas e depois 3 doses de plasmídeo; (2) os camundongos receberam o mesmo número de doses de P. acnes ou polissacarídeo simultaneamente com a administração das doses do plasmídeo. Com o primeiro protocolo de imunização a bactéria induziu efeito adjuvante sobre a resposta específica para trans-sialidase, aumentando os níveis de IgG total específico devido a um aumento nos níveis de IgG2b para trans-sialidase. Reduziu os níveis de IgG1 específica o que determinou o valor menor da razão entre IgG1/IgG2a, indicando modulação no padrão de resposta. A bactéria também induziu aumento da proliferação de linfócitos TCD4+ esplênicos quando estimulados in vitro com a enzima. Este mesmo efeito foi observado com o polissacarídeo solúvel o qual também induziu uma forte liberação de IFN- por estas células. Este componente reduziu os níveis de IgG1 específica diminuindo a razão IgG1/IgG2a, indicando modulação no padrão de resposta Th1. A administração simultânea da bactéria e principalmente do polissacarídeo, com o plasmídeo (Protocolo 2)aumentou a resposta Th1 específica para trans-sialidase, como revelado pela redução da razão de IgG1/IgG2a, por aumentar fortemente os níveis de IgG2a e aumentar in vitro a proliferação e síntese de INF- por células TCD4+. In vivo observamos forte redução da parasitemia no 7º e 8º após a infecção com o T. cruzi. Nossas observações sugerem que a P. acnes e seu componente polissacarídico exercem forte efeito adjuvante sobre a resposta a vacina DNA para T. cruzi e aumentam seu potencial protetor contra a infecção pelo parasita.