Expressão gênica do estresse oxidativo e da defesa antioxidante na isquemia e reperfusão intestinal em camundongos isogênicos submetidos a oxigenação hiperbárica

Abstract

Objetivo: determinar o perfil da expressao genica relacionado ao estresse oxidativo e a resposta antioxidante do intestino de camundongos isogenicos submetidos a isquemia e reperfusao e tratados com oxigenacao hiperbarica. Metodos: vinte e quatro camundongos (C57BL/6) foram submetidos a anestesia, laparotomia e a intervalos de 60 minutos de isquemia e reperfusao intestinal (IR). Tres grupos foram tratados com oxigenacao hiperbarica (GOHB) em periodos distintos: durante a isquemia (GOHB+I), durante a reperfusao (GOHB+R) e durante a isquemia e a reperfusao (GOHB+IR). Seis animais submetidos a IR nao receberam OHB (GIR). Outros seis animais nao foram submetidos a IR ou OHB (GC). Foram avaliadas as alteracoes morfologicas de necrose intestinal (escore de Chiu et al) e a expressao genica pela Reacao de Polimerase em Cadeia em Tempo Real (PCR-RT). Foram estudados um total de 84 genes das familias glutationa peroxidases, peroxiredoxinas, peroxidases e agrupamentos de genes associados ao estresse oxidativo, especies reativas de oxigenio e transportadores de oxigenio. A expressao de cada gene grupo foi comparada em cada grupo com o GC. Resultados: nos animais do GIR 86,9% dos genes foram hiperexpressos mostrando uma clara relacao entre o estresse oxidativo e a resposta antioxidante da IR. Semelhante hiperexpressao genica ocorreu em GOHB+I (88,09%) e GOHB+R (86,9%). No entanto, no GOHB+IR a porcentagem de expressao foi significantemente menor (61,9%), coincidindo com um escore de lesao morfologica tambem significantemente menor que os outros tres grupos. A analise dos dados por familias/agrupamentos mostrou perfil semelhante de hiperexpressao ao resultado global, exceto na familia das peroxiredoxinas que nao mostrou variacao significante entre os quatro grupos. Conclusoes: A IR promove uma resposta de hiperexpressao dos genes relacionados com o estresse oxidativo e a reposta antioxidante. Por outro lado, o tratamento com a OHB mostrou-se associada ao bloqueio da hiperexpressao somente quando aplicada durante a isquemia e durante a reperfusao