| dc.contributor | PAIVA, Patrícia Maria Guedes | |
| dc.contributor | NAPOLEÃO, Thiago Henrique | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/2291878722264444 | |
| dc.contributor | http://lattes.cnpq.br/2885145995086459 | |
| dc.creator | ALVES, Robson Raion de Vasconcelos | |
| dc.date | 2019-06-12T23:17:15Z | |
| dc.date | 2019-06-12T23:17:15Z | |
| dc.date | 2018-02-26 | |
| dc.date.accessioned | 2022-10-06T18:01:11Z | |
| dc.date.available | 2022-10-06T18:01:11Z | |
| dc.identifier | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/31075 | |
| dc.identifier.uri | http://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/3988875 | |
| dc.description | As lectinas, proteínas de ligação a carboidratos, isoladas a partir de sementes de Moringa
oleifera (WSMoL), bem como da entrecasca (MuBL), cerne (MuHL) e folha (MuLL) de
Myracrodruon urundeuva são agentes larvicidas contra Aedes aegypti. WSMoL também foi relatada como agente ovicida contra este mosquito e a sua concentração necessária para
reduzir a taxa de eclosão em 50% (EC50) é de 0,1 mg/mL. Este trabalho teve como objetivo
avaliar a atividade ovicida de MuBL, MuHL e MuLL, bem como avaliar os locais de ligação
de WSMoL e MuBL nos ovos de A. aegypti. As lectinas foram isoladas seguindo protocolos
previamente estabelecidos que incluíram extração das proteínas da farinha (10 g) do tecido
vegetal com 100 mL de água destilada (WSMoL) ou NaCl 0,15 M (MuHL, MuBL, MuLL),
precipitação de proteínas com sulfato de amônio (0-60%, WSMoL; 20-40%, MuBL; 40-60%, MuHL; 60-80%, MuLL) e cromatografias em colunas de quitina equilibradas (0,6 mL/min) com NaCl 0,15 M e eluidas com ácido Acético 1,0 M. As lectinas isoladas foram dialisadas (6h em água destilada) para a eliminação do eluente. Os ovos em papel de filtro foram selecionados considerando a sua integridade utilizando um estereomicroscópio. Cada ensaio ovicida correspondeu a 20 mL de solução de lectina onde foram imersos 50 ovos. O número de larvas eclodidas foi determinado após 72 h de incubação a 25-27 °C e a EC50 foi
determinada pela análise de probit. Os conjugados WSMoL-FITC e MuBL-FITC (na EC50)
foram utilizados para avaliar os locais de ligação das lectinas utilizando um microscópio de
fluorescência. Os controles contendo apenas os ovos ou ovos incubados apenas com o FITC
também foram realizados. MuBL, MuHL e MuLL foram agentes ovicidas e os valores de
EC50 foram 0,26, 0,80 e 0,88 mg/mL, respectivamente. Com base nos melhores valores da
EC50, WSMoL e MuBL foram selecionados para análise de microscopia de fluorescência. Em
comparação com os controles, as imagens revelaram a presença de WSMoL-FITC na cabeça,
proventriculo e intestino de embriões. A marcação MuBL-FITC foi observada na cabeça e no
trato digestivo. Em conclusão, as lectinas de M. urundeuva também são agentes ovicidas
contra A. aegypti e a atividade ovicida de WSMoL e MuBL está ligada à penetração dessas
proteínas no ovo e interação com o trato digestivo do embrião em desenvolvimento. | |
| dc.description | FACEPE | |
| dc.description | Lectins, carbohydrate-binding proteins, isolated from seeds of Moringa oleifera (WSMoL) as well as bark (MuBL), heartwood (MuHL) and leaf (MuLL) of Myracrodruon urundeuva are larvicidal agents against Aedes aegypti. WSMoL was also reported as an ovicidal agent
against this mosquito and the concentration of this lectin required to reduce the hatching rate
in 50% (EC50) is 0.1 mg/mL. This work aimed to evaluate the ovicidal activity of MuBL, MuHL and MuLL as well as to evaluate the binding sites of WSMoL and MuBL in the eggs.
The lectins were isolated following previously established protocols which included extraction of proteins from tissue (10 g) plants with 100 mL of distilled water (WSMoL) or 0.15 M NaCl (MuHL, MuBL and MuLL), ammonium sulfate protein precipitation (0-60%, WSMoL; 20-40%, MuBL; 40-60%, MuHL; 60-80%, MuLL) and chromatography on chitin columns (0.6 mL/min) equilibrated with 0.15 M NaCl and eluted with 1.0 M acetic acid. The isolated lectins were dialyzed (6h in distilled water) for the removal of the eluent. Eggs on filter papers were selected by considering their integrity using a stereomicroscope. Each ovicidal assay corresponded to 20 mL of lectin solution in which were immersed 50 eggs. The number of hatched larvae was determined after 72 h of incubation at 25-27 ºC and the EC50 was determined by probit analysis. WSMoL-FITC and MuBL-FITC conjugates (at EC50) were used to evaluated binding sites of the lectins using a fluorescence microscope. Controls
contained only the eggs and eggs incubated only with FITC were performed. MuBL, MuHL
and MuLL were ovicidal agents and the EC50 values were 0.26, 0.80 and 0.88 mg/mL, respectively. Based on the best EC50 values, WSMoL and MuBL were selected for fluorescence microscopy analysis. Compared with controls, the images revealed the presence
of WSMoL-FITC in the head, proventriculus, and gut of embryos. MuBL-FITC labeling was
observed in the head and digestive tract. In conclusion, M. urundeuva lectins are also ovicidal
agents against A. aegypti and the ovicidal activity of WSMoL and MuBL is linked to penetration of these proteins in the egg and interaction of them with the digestive tract of the
embryo in development. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de Pernambuco | |
| dc.publisher | UFPE | |
| dc.publisher | Brasil | |
| dc.publisher | Programa de Pos Graduacao em Ciencias Biologicas | |
| dc.rights | embargoedAccess | |
| dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil | |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/ | |
| dc.subject | Lectinas | |
| dc.subject | Moringa oleifera | |
| dc.subject | Aedes aegypti | |
| dc.title | Avaliação de atividade ovocida de lectinas ligadoras de quitina contra Aedes aegypti | |
| dc.type | masterThesis | |
