O uso indiscriminado de antibióticos tem sido um dos maiores fatores para o favorecimento dos quadros de resistência bacteriana por provocar uma pressão seletiva sobre as bactérias tornando-as multirresistentes, o que no âmbito hospitalar pode resultar em um grande problema de saúde pública. Um dos patógenos mais comumente isolados são Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) juntamente ao Enterococcus spp resistente à vancomicina (ERV), que tem apresentado crescimento contínuo em instituições hospitalares a nível mundial. O presente estudo teve como objetivo avaliar a prevalência e o perfil de resistência de cultura de vigilância epidemiológica para Staphylococcus aureus e Enterococcus spp em um Serviço Hospitalar Universitário, no período de janeiro de 2015 a dezembro de 2016. Trata-se de um estudo retrospectivo, baseado na análise dos resultados de exames de cultura qualitativa de “swab” nasal e retal de pacientes internados no Hospital Universitário Onofre Lopes - EBSERH (HUOL) em Natal, no período do estudo. Os dados foram coletados em livros de registro do setor de microbiologia, do referido hospital, e armazenados em planilhas no Microsoft Excel® 2010, submetidos à análise usando o teste de Fisher, programa Stata®. Observou-se que a implementação das culturas de vigilância diminuiu as taxas de isolados resistentes e na UTI houve uma redução significativa em relação as demais alas. Não foi observada diferença significativa para as variáveis idade e sexo. Os resultados desse estudo servem como alerta a equipe de saúde e contribui com a melhoria dos programas de vigilância da CCIH2018-08-20