masterThesis
Caracterização da propriedade imunoestimulatória de Virus-like particles de Triatoma virus e antígenos recombinantes quiméricos de Trypanosoma cruzi
Registro en:
QUEIROZ, Aline Maria Vasconcelos. Caracterização da propriedade imunoestimulatória de Virus-like particles de Triatoma virus e antígenos recombinantes quiméricos de Trypanosoma cruzi. 2020. 88f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2020.
Autor
Queiroz, Aline Maria Vasconcelos
Resumen
The infection caused by the protozoan Trypanosoma cruzi affects humans and is called
Chagas disease. Currently, the main measures available to reduce the incidence of this
disease are drug treatment and vector control. The development of vaccines is mainly
through the use of antigens of the etiologic agent. Virus-like particles (VLPs) are
structures analogous to viral capsids composed essentially of structural proteins, they
have no viral genetic material and are widely used in vaccination protocols because of
their immunostimulatory properties. In this context, the objective of this study was to use
strategies in a murine immunization model to characterize the immunostimulatory
capacity of virus-like particles from Triatoma virus (VLPs-TrV), analyzed in the presence
or absence of the aluminium hydroxide vaccine adjuvant. In parallel, observing the
immunogenic behavior of four T. cruzi chimeric recombinant proteins in mix form (mixIBMP) associated or not with the VLPs-TrV. For this, BALB/c mice (Mus musculus)
were immunized once or twice, depending on the strategy, with serum samples collected
15, 30 and 45 days after the immunization. Subsequently, serum samples from animals
immunized with VLPs-TrV were obtained at different times after immunizations. The
total IgG, IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 specific antibody profile was determined by
enzyme immunoassay. The data obtained demonstrate the ability of VLPs-TrV, without
the presence of aluminum, to preferably induce IgG2b and IgG3 type antibodies; in fact,
the use of aluminum did not interfere with the total IgG profile. In addition, mix-IBMP
has a better profile of total IgG and IgG1 and IgG3 subclasses when associated with
VLPs-TrV, even with the possible antigenic competition between the VLPs-TrV and
IBMP proteins. In conclusion, these results contribute to the possible use of VLPs-TrV as
an adjuvant in vaccine formulations in a murine model, although the mechanisms in
inducing the polarized cellular immune response to Th1 need to be more clearly
understood. In addition, evaluating the use of proteins in new protocols in vivo as
antigenic candidates is interesting. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A infecção causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi acomete os seres humanos
ocasionando a doença de Chagas. Atualmente, as principais medidas disponíveis para esta
doença são o tratamento medicamentoso e o controle vetorial. O desenvolvimento de
vacinas acontece, principalmente, pelo o uso de antígenos do agente etiológico. As
partículas semelhantes a vírus (do inglês virus-like particles ou VLPs) são estruturas
análogas a cápsides virais compostas essencialmente por proteínas estruturais, não
possuem material genético viral e são amplamente utilizadas em protocolos de vacinação
por causa de suas propriedades imunoestimulatórias. Nesse contexto, o objetivo do atual
trabalho foi utilizar estratégias em um modelo murino de imunização para caracterizar a
capacidade imunoestimulatória de partículas semelhantes a vírus de Triatoma virus
(VLPs-TrV), na presença e ausência do adjuvante hidróxido de alumínio. E
paralelamente, observar o comportamento imunogênico de quatro proteínas
recombinantes quiméricas de T. cruzi em forma de mix (mix-IBMP) associadas ou não
as VLPs-TrV. Para isso, camundongos BALB/c (Mus musculus) foram imunizados uma
ou duas vezes, a depender da estratégia, com amostras de soro colhidas 15, 30 e 45 dias
após a imunização. O perfil de anticorpos específicos IgG total, IgG1, IgG2a, IgG2b e
IgG3 foram determinados por teste imunoenzimático. Os dados obtidos demonstram a
capacidade das VLPs-TrV sem a presença de alumínio de induzir preferencialmente os
anticorpos do tipo IgG2b e IgG3, aliás, o uso do alumínio não interferiu no perfil de IgG
total. Além disso, mix-IBMP tem melhor perfil de IgG total e subclasses IgG1 e IgG3
quando associado as VLPs-TrV, mesmo com a possível competição antigênica entre as
VLPs e mix-IBMP. Em conclusão, os resultados encontrados contribuem para a possível
utilização das VLPs-TrV como adjuvante em formulações vacinais em modelo murino,
apesar de os mecanismos na indução da resposta imune polarizada para Th1 precisarem
ser mais claramente entendidos. Ademais, avaliar a utilização das proteínas em novos
protocolos in vivo como candidatos antigênicos torna-se interessante. 2021-05-30