Estudo da expressão gênica diferencial em células dendríticas humanas na fase inicial da interação com Trypanosoma cruzi

Abstract

As células dendríticas (DCs), como as mais potentes células apresentadoras de antígenos, são importantes na ligação entre imunidade inata e adaptativa. Dependendo de muitos fatores, estas células podem modular respostas, influindo no desenvolvimento de doenças complexas como a doença de Chagas. Assim, o entendimento da interação inicial entre o sistema imune e o Trypanosoma cruzi pode revelar novos alvos estratégicos de estudo e tratamento para esta doença. Nesse contexto, o presente trabalho simula o contato inicial parasito-DC em uma infecção natural com o objetivo de estudar a modulação gênica funcional das DCs nessas condições. O transcritoma de DCs humanas após 12 h de interação in vitro com o parasito foi analisado e validado aqui. Uma grande variação foi encontrada entre doadores e entre amostras infectadas e controle, onde 468 genes mostraram expressão diferencial, incluindo genes de proteassoma, ubiquitinação, ISGilação e relacionados com resposta imune. Entre as vias de interesse que foram diferencialmente moduladas estão a via de resposta a vírus e a via dos NLRs, pouco estudadas dentro do contexto da interação DCs-T. cruzi. Os genes USP18, CXCL9, TNFSF18, WNT5B, PLCB2, OASL, MX1 e GPB4 e as citocinas IL-10, IL-1β, IL-8 e TNF foram selecionadas para a validação do transcritoma, conseguindo corroborar as análises feitas. Finalmente, experimentos preliminares com DCs de camundongo foram feitos estimulando a via de resposta viral e avaliando a resposta nas células murinas. Este é o primeiro transcritoma de uma célula imune em contato com o T. cruzi; ea visão detalhada da resposta de uma célula apresentadora de antígenos ante o parasito será de ajuda para o entendimento da evolução diferencial dos indivíduos infectados da doença de Chagas, demonstrando, ademais, que uma via amplamente estudada é de fundamental importância desse primeiro contato.