dc.contributor | Ossa Reyes, Humberto | |
dc.creator | Rojo Orozco, María Alejandra | |
dc.date.accessioned | 2021-12-10T16:49:55Z | |
dc.date.accessioned | 2022-09-28T18:16:16Z | |
dc.date.available | 2021-12-10T16:49:55Z | |
dc.date.available | 2022-09-28T18:16:16Z | |
dc.date.created | 2021-12-10T16:49:55Z | |
dc.date.issued | 2018 | |
dc.identifier | http://repositorio.ufps.edu.co/handle/ufps/2279 | |
dc.identifier | 114862 | |
dc.identifier | instname:Universidad Francisco de Paula Santander | |
dc.identifier | reponame:Repositorio Digital UFPS | |
dc.identifier | repourl:https://repositorio.ufps.edu.co/ | |
dc.identifier | TIB 00202/2018 | |
dc.identifier.uri | http://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/3700393 | |
dc.description.abstract | En el presente trabajo se estandarizó el protocolo para la tipificación del alelo HLA B*27 por medio de la técnica de PCR-SSP en mediana resolución e identificación en alta resolución de algunos de los subtipos más representativos. Durante el transcurso del proyecto se evaluaron, analizaron y diseñaron los cebadores y mezclas por medio de herramientas bioinformáticas como UGENE, AmplifX y base de datos como IPD-IMGT/HLA, NCBI, OligoAnalyzer y dbMHC. Para la estandarización del protocolo se diseñaron 17 mezclas formadas por 28 cebadores de los cuales 2 fueron tomados de bibliografía y 4 fueron diseñados por bioinformática, los demás cebadores son utilizados para la tipificación completa del locus B e identificados como específicos para el alelo B*27. Todas las mezclas fueron evaluadas por medio de ensayos in Silico y para el diseño del ciclo térmico se tomaron en cuenta parámetros como la Temperaturas Melting y el %GC de los cebadores. La lectura del producto de PCR se realizó por medio de electroforesis en gel de agarosa al 2% con bromuro de etidio como agente intercalante. Los ADN fueron muestra guardas en el laboratorio como control positivo de anteriores trabajos y muestras remitidas al laboratorio para tipificación HLA completa o locus especifico durante el periodo del proyecto. En total se tipificaron molecularmente 30 muestras en mediana resolución es decir solo el diagnostico positivo o negativo para este alelo de las cuales 11 fueron tipificadas en alta resolución encontrando los subtipos B*27:02, B*27:03, B*27 05 y B*27:07. Tipificación certificada y comparada con el kit comercial de OlerupSSP alta resolución B*27. | |
dc.language | spa | |
dc.publisher | Universidad Francisco de Paula Santander | |
dc.publisher | Facultad de Ciencias Agrarias y del Ambiente | |
dc.publisher | San José de Cúcuta | |
dc.publisher | Ingeniería Biotecnológica | |
dc.rights | Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) | |
dc.rights | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ | |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
dc.rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 | |
dc.source | http://alejandria.ufps.edu.co/descargas/tesis/1610804.pdf | |
dc.title | Tipificación molecular del hla b* 27 mediana y alta resolución mediante pcr-ssp. | |
dc.type | Tesis | |