Trabajo de grado - Maestría
Evaluación de la actividad antibacteriana de las secreciones producidas por la piel de la rana Hypsiboas crepitans en simbiosis con su microbiota nativa
Fecha
2017Registro en:
instname:Universidad de los Andes
reponame:Repositorio Institucional Séneca
Autor
Casas Vargas, Julian Camilo
Institución
Resumen
"En las últimas décadas se ha visto un incremento en la aparición de cepas bacterianas multi-resistentes a antibióticos lo que ha generado altas tasas de mortalidad. Además, el descubrimiento de nuevos antibióticos para controlar este problema ha disminuido, lo cual deriva en la necesidad de buscar nuevos antimicrobianos que contrarresten esta problemática. Una potencial fuente son los Péptidos Antimicrobianos (AMPs) encontrados en anfibios, como en la especie Hypsiboas crepitans, cuyas propiedades hacen que la resistencia de bacterias frente a este tipo de moléculas sea poco probable. Conjuntamente, su efecto inhibitorio ya ha sido comprobado frente a diferentes patógenos. Asimismo, se ha demostrado que las bacterias simbiontes asociadas a la piel de rana también presentan esta actividad. A pesar de esto, no existen ensayos en los cuales se evalúe la actividad de inhibición que resulta de la interacción entre la piel de la rana y su microbiota nativa. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue valuar la actividad antibacteriana cuando existe la interacción entre la piel de H. crepitans con su microbiota nativa. Para esto, se capturaron 11 especímenes en La Mesa, Cundinamarca, a los cuales se les realizó una identificación de las bacterias nativas de la piel mediante la secuenciación de la 16s ADNr. Paralelamente, la piel de cada espécimen fue lavada usando dos diferentes tratamientos, uno con antibióticos y otro sin antibióticos, para luego ser cultivada por la técnica de Micro-órganos (MOs) para obtener medios condicionados (MCs) de cada uno de ellos. A partir de estos se realizaron ensayos antimicrobianos contra las bacterias patógenas Staphylococcus aureus ATCC 25923, S. aureus 55, Pseudomonas aeruginosa PAO1 y P. aeruginosa M18. Asimismo, la viabilidad de los MOs fue evaluada por el ensayo de reducción de sales de tetrazolio (MTT) y la de las bacterias nativas por siembra en superficie..."--Tomado del Formato de Documento de Grado. "In recent decades, the appearance of multi-resistant bacterial strains to antibiotics has shown an increase which has generated high mortality rates. In addition, the discovery of new antibiotics to control this problem has decreased. As consequence, they lead to the need to look for new antimicrobials that counteract this problem. Antimicrobial Peptides (AMPs) are a potential source found in amphibians, such as Hypsiboas crepitans, whose properties make that the bacteria resistance against these types of molecules is unlikely. Furthermore, its inhibitory effect has already been demonstrated against different pathogens. Simultaneously, symbiotic native bacteria from the frog skin have exhibit this activity as well. Despite this, there are no trials in which the inhibition activity that results of the interaction between the frog skin and its native microbiota has not been evaluated. Hence, the objective of this work was to evaluate the antibacterial activity when there is an interaction between the skin of H. crepitans and its native microbiota. For this, 11 specimens were captured in La Mesa, Cundinamarca. For each one, the native bacteria of the skin were identified by applying the sequencing of the 16 rDNAs. In parallel, the skin of each specimen was washed using two different treatments, one with antibiotics and the other without antibiotics. Afterward, they were cultivated by the Micro-Organs (MO) technique to obtain conditioned media (CM) for each of them. From these, antimicrobial experiments were carried out against the pathogenic bacteria Staphylococcus aureus ATCC 25923, S. aureus 55, Pseudomonas aeruginosa PAO1 and P. aeruginosa M18. Likewise, the viability of the MOs was by the test of reduction of the sales of tetrazolium (MTT), and for the native bacteria by plaquing on surface. Finally, the association between the MOs and bacteria was evaluated by Scanning Electron Microscopy (SEM)..."--Tomado del Formato de Documento de Grado.