Implementación de un sistema in vitro para la evaluación fenotípica y funcional de la interacción de Células Dendríticas con Células NK

Abstract

La interacción entre Células Dendríticas (DCs) y NKs juega un papel importante en la inducción de inmunidad. El diseño de un sistema in vitro que permita analizar factores que influencian la calidad de la interacción cooperativa entre estas dos células lo consideramos importante. En este trabajo utilizando muestras de sangre se comparó ex vivo el porcentaje e inmunofenotipo de monocitos, NKs totales y de diferentes subpoblaciones de NKs definidas de acuerdo con la expresión diferencial de los marcadores CD56 y CD16, tanto en Sangre Total como en PBMCs entre individuos Jóvenes y Adultos Mayores de 60 años. Los análisis ex vivo evidenciaron alteraciones en la representatividad de subpoblaciones de NKs evidenciada en Sangre Total que no fueron claramente detectadas cuando se utilizaron PBMCs. De otra parte, un sistema de cultivo in vitro de DCs cocultivadas con NKs fue implementado con el fin de evaluar la influencia de la edad y la interacción célula-célula en la mutua activación de estas dos células. Estos cocultivos permitieron evidenciar una capacidad de DCs maduras e inmaduras de inducir la activación de células NKs autólogas y la capacidad de NKs activadas por agonistas de TLRs de potenciar tanto la maduración de DCs maduras como la maduración de DCs inmaduras autólogas. De manera interesante los resultados de los cocultivos de NKs con DCs mostraron (i) que las funciones anotadas son dependientes de la interacción célula-célula; (ii) una capacidad disminuida de las NKs de Adultos Mayores activadas, con respecto a las de individuos Jóvenes, para inducir la maduración de DCs inmaduras autólogas y (iii) una deficiencia de DC maduras de Adultos Mayores para inducir la activación de NKs autólogas. En conjunto los resultados sugieren la validez del sistema de cocultivos implementados para analizar factores asociados al envejecimiento y a la interacción célula-célula que modulan la interacción de NKs y DCs.