Artículo de revista
Establecimiento y caracterización de una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme.
Autor
Rincón, Verónica
Roa, Carmen Lucía
Osorio, Gloria
Aristizabal, Gerardo
Castellanos, Jaime E.
Institución
Resumen
Introducción: Las líneas celulares y los cultivos primarios son una excelente herramienta para el estudio de la biología, desarrollo
y respuesta a la terapia en tumores cerebrales.
Objetivo: Establecer y caracterizar una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme como un modelo de estudio in vitro
para la extrapolación y aplicación futura en terapia génica.
Material y métodos: Se obtuvo una muestra de un paciente con diagnóstico clínico e histopatológico de glioblastoma
multiforme, se caracterizó mediante inmunohistoquímica en cortes de tejido y por inmunocitoquímica sobre células cultivadas a partir
del tumor desde el inicio del cultivo y durante los seis primeros pases, con dos tipos de marcadores específicos para glía: GFAP
(glial fibrillary acidic protein) y S-100 (proteína de unión a calcio). Además, se evaluó la expresión de p53 y Bcl-2, como moduladores
de apoptosis. Por último se hizo la caracterización citogenética.
Resultados: Histopatológicamente, se confirmó el diagnóstico de glioblastoma multiforme. En los cultivos primarios se
encontraron características citomorfológicas propias de un glioblastoma: células fibroblastoides planas, células con escaso
citoplasma con 3 ó más procesos y por último bipolares o unipolares. Se encontró una expresión diferencial con los cuatro
marcadores, con un patrón de marcaciones a nivel citoplasmático y nuclear a través de los pases estudiados. La línea celular se
caracterizó por ser en su mayoría aneuploide con un número modal cromosómico entre 43 y 45, con un gran número de poliploidías
(55-102 <4n>, XXYY) y endo-reduplicaciones (end 45, X, -Y).
Conclusión: Se estableció una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme con un fenotipo estable, con un notable
mantenimiento del perfil glial y citogenético. Introduction: Cell lines and primary cultures are a useful tool for studying basic biology, development and therapy responses
in cancer and nervous system tumors.
Aim: To establish and characterize a human glioblastoma multiforme (GBM) derived cell line as an in vitro biological model to
study nervous system cancer chemotherapy and gene therapy.
Materials and methods: A resected tumor piece was obtained from a patient with clinical and histopathological diagnosis of
GBM. It was processed to obtain viable cells to culture and histological sections, which were immunostained to glial fibrillary acid
protein (GFAP) and S-100 protein (calcium binding protein) and to evaluate expression of apoptosis related proteins p53 and Bcl-
2. Finally a cytogenetic evaluation was carried out.
Results: Histopathological examination confirmed classic findings of GBM. Typical cytomorphological features of GBM were
found in cells of the primary cultures: bipolar or unipolar cells, flat fibroblastoid cells, process-bearing cells with scant cytoplasm
and 3 or more processes. It was found a differential expression of the four markers, which had a nuclear and cytoplasmatic staining pattern throughout studied subcultures. Cell line exhibited a
high level of aneuploidy with modal chromosomal number
between 43-45, with presence of poliploidy (55-102 <4n>, XXYY)
and endoreduplication (end 45, X, -Y).
Conclusion: It was established a GBM derived cell line with
a stable phenotype, maintaining morphological cell and
cytogenetic characteristics.