Efectos de la ApC, una toxina de la anémona de mar, sobre las corrientes de sodio de las neuronas de mamíferos

Abstract

Hemos caracterizado la acción de APC, un polipéptido de la toxina de la anémona de mar aislado Anthopleura Elegantissima, sobre las corrientes de sodio neuronales (INA) utilizando las técnicas actuales y de fijación de voltaje. Las neuronas de los ganglios de la raíz dorsal de ratas Wistar (P5-9) en cultivo primario se utilizaron para este estudio. Estas células expresan tetrodotoxina sensibles (TTX-S) y tetrodotoxina resistente (TTX-R) INA. En experimentos actual-clamp, la aplicación de la APC aumenta la duración media del potencial de acción. En condiciones de fijación de voltaje, el principal efecto de APC fue un aumento dependiente de la concentración en el curso del tiempo de inactivación TTX-S Ina. No se observaron efectos significativos sobre la evolución en el tiempo de activación o en el pico de la amplitud de la corriente. APC también produjo un desplazamiento hiperpolarizante en la tensión a la que se inactivan 50% de los canales y causó una disminución significativa en la dependencia de voltaje de la inactivación del canal de Na +. No se observaron efectos en la TTX-R INA. Nuestros resultados sugieren que la APC retarda los cambios conformacionales requeridos para la inactivación rápida de los canales de Na + de mamífero en una forma similar a cualquier toxina Site 3, aunque con una potencia mayor que ATX-II, una toxina de la anémona altamente homóloga. We have characterized the actions of ApC, a sea anemone polypeptide toxin isolated from Anthopleura elegantissima, on neuronal sodium currents (INa) using current and voltageclamp techniques. Neurons of the dorsal root ganglia of Wistar rats (P5–9) in primary culture were used for this study. These cells express tetrodotoxin-sensitive (TTX-S) and tetrodotoxin-resistant (TTX-R) INa. In current-clamp experiments, application of ApC increased the average duration of the action potential. Under voltage-clamp conditions, the main effect of ApC was a concentration-dependent increase in the TTX-S Ina inactivation time course. No significant effects were observed on the activation time course or on the current peak-amplitude. ApC also produced a hyperpolarizing shift in the voltage at which 50% of the channels are inactivated and caused a significant decrease in the voltage dependence of Na+ channel inactivation. No effects were observed on TTX-R INa. Our results suggest that ApC slows the conformational changes required for fast inactivation of the mammalian Na+ channels in a form similar to other site-3 toxins, although with a greater potency than ATX-II, a highly homologous anemone toxin.